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中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3767.20—2014出口食品中转基因成分环介导等温扩增(LAMP)检测方法第 20 部分:水稻 Bt-63 品系Loop-mediated isothermal amplification detection method for geneticallymodified components in food for export-Part 20:Rice Bt-632014-08-01实施2014-01-13发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局
SN/T 3767.20---2014前言SN/T3767《出口食品中转基因成分环介导等温扩增(LAMP)检测方法》共分为30部分:第1部分:通用要求和定义;第2部分:筛选方法;第3部分:玉米Bt-11品系;第4部分:玉米Bt176品系;第5部分:玉米GA21品系;第6部分:玉米MIR162品系;第7部分:玉米MIR604品系;第8部分:玉米MON810品系;第9部分:玉米MON863品系;第10部分:玉米MON88017品系;第11部分:玉米MON89034品系;第12部分:玉米 T-25品系;第13部分:玉米3272品系;第14部分:玉米59122品系;第15部分:大豆A2704-12品系;第16部分:大豆A5547-127品系;第17部分:大豆DP356043品系;第18部分:大豆GTS40-3-2品系;第19部分:大豆MON89788品系;第20部分:水稻Bt-63品系;第21部分:水稻KF6品系;第22部分:水稻KF8品系;第23部分:水稻KMD品系;第24部分:水稻LLRICE62品系;第25部分:水稻M12品系;第 26部分:水稻T1C-19 品系;第 27部分:水稻 T2A-1品系;第28部分:小麦B73-6-1品系;第29部分:甜菜H7-1品系;第30部分:油菜RT-73品系。本部分为SN/T3767的第20部分本部分按照GB/T1.1--2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位:中华人民共和国广东出入境检验检疫局、中华人民共和国汕头出人境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国福建出人境检验检疫局、中华人民共和国辽宁出人境检
SN/T 3767.20--2014验检疫局、中华人民共和国珠海出人境检验检疫局、中华人民共和国北京出人境检验检疫局、中华人民共和国上海出人境检验检疫局、仲恺农业工程学院、广州迪澳生物科技有限公司。本部分主要起草人:易敏英、凌莉、卓锦雪、蔡颖、刘静宇、谢力、陈颖、邵碧英、曹际娟、冯家望、曾静、李晓虹、高苏娟、石磊、张隽、陈源树、李婷、关丽军、李志勇。
SN/T 3767.20---2014出口食品中转基因成分环介导等温扩增(LAMP)检测方法第20部分:水稻Bt-63品系1 范围SN/T3767的本部分规定了稻谷和大米中转基因水稻Bt-63品系特异性的环介导等温扩增(LAMP)初筛检测方法。本部分适用于稻谷和大米中转基因水稻Bt-63.品系特异性的定性检测。本方法的定性检测低限为0.5%(质量分数)。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。:凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T19495.2转基因产品检测‘实验室技术要求GB/T19495.3转基因产品检测‘核酸提取纯化方法GB/T19495.7转基因产品检测抽样和制样方法SN/T 2584水稻及其产品中转基因成分检测·实时荧光PCR法SN/T3767.2--2014出口食品中转基因成分环介导等温扩增(LAMP)检测方法第2部分:筛选方法3防污染措施环介导等温扩增检测过程的防污染措施应符合GB/T19495.2的规定。4抽样与制样按照GB/T19495.7的规定执行。核酸提取纯化5按照GB/T19495.3的规定执行。6LAMP检测方法6.1原理6.1.1一般原理根据转基因水稻Bt-63 品系外源基因和水稻边界序列设计特异性内引物和外引物各一对,特异性1
SN/T 3767.20—2014目标序列和引物碱基序列参见附录 A。引物特异性识别目标序列上的六个独立区域,利用Bst 酶启动循环链置换反应,在水稻Bt-63品系特异目标序列启动互补链合成,在同一链上互补序列周而复始形成有很多环的花椰菜结构的茎-环 DNA 混合物;从 dNTP析出的焦磷酸根离子与反应溶液中的 Mg²+结合,产生副产物(焦磷酸镁)形成乳白色沉淀,加人显色液,即可通过颜色变化观察判定结果。6.
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