SN_T 2578-2010进出口蜂王浆中15种喹诺酮类药物残留量的检测方法 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2578---2010进出口蜂王浆中15种喹诺酮类药物残留量的检测方法液相色谱一质谱/质谱法Determimation of fiftcen quinolones residues inroyal jelly for import and export--LC-MS/MS2010-12-01实施2010-05~27发布中华人民共和国发布国家质量监督松检疫总局K数码防伪 SN/T2578---2010前言本标准按照GB/T1.1-~2009给出的规则掌。本标准由国家认证认可监督管理委员会提并川。本标准由中华人民共和国浙江出人境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人：谢文、陈笑梅、丁慧璜、钱艳、刘海山、张慧敏。J SN/I 2578---2010进出口峰王浆#15种隆诺酮类药物残留量的检测方法液相色谱·质谱/质谱法1范围本标准规定了进出口蜂王浆中喹诺酮残留量测定的制样和液相色谱-质谱/质谱测定方法。本标准适用于蜂王浆中麻保沙星、依诺沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星、洛美沙星、奥比沙星、双氟沙星、沙拉沙星、司帕沙星、恶喹酸、萘啶酸、氟甲噻残留量的检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要用甲醇沉淀样品中蛋白自质，上清液用)asis（HLB)固相萃取小柱净化，液相色谱-质谱/质谱测定，外标法或内标法定量。4试剂和材料除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的-级水。4.1乙睛：高效液相色谱级。4.2甲醇：高效液相色谱级。4.3甲酸：高效液相色谱级。4.4 氨水:25%~28%。4.5甲醇水溶液：甲醇-水（1十9，体积比）。4.65%氨水甲醇溶液：氨水甲醇（5·195.体根出）。A。7麻保沙星、依诺沙星、氧氟沙罩、诺氟沙环闪沙星、达氟沙星、恩诺沙星、洛美沙星、奥比沙星、双氟沙星、沙拉沙星、司帕沙星、恶噻酸、萘喷酸、氟甲喹、诺氟沙星-D5、环丙沙星-D8标准品：纯度大于等于96%，见附录A表A.1。4.8标准储备溶液：分别称取经折算适量标准晶（4.7)（精确至0.1mg），分别用甲醇溶解定容，溶液浓度为100ug/mL，1℃～4℃冰箱保存。有效期3个月。4.9诺氟沙星-D5、环闪沙星-D8同位素内标标准储备溶液：分别称取适量标准品（4.7），分别用甲醇溶解定容，溶液浓度为100ug/ml，1℃4℃冰箱保存。4。10空白样品提取液：用不含15种喹诺酮的峰1浆样品，按照第7章制备空白样品溶液。1 SN/T 2578.--20104.11标准工作溶液：根据需要用空自样品提取液（1.10）将标准储备液稀释成2ng/ml、2.5ng/ml、5ng/ml.、10ng/ml、20ng/ml.的混合标准工作溶液+相当子样品中含有4uμg/kg、5μg/kg、10ug/kg、20g/kg、40ug/kg喹诺酮类药物。内标溶液浓腹：为7、5ng/mL.4。12（)asis（HLB）围相萃取小柱。500m.3m!.或相当者。使月前依次用5mL甲醇，5mL水预洗。A.13微孔滤膜：0.45μm，有机相。5仪器和设备5.1高效液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离下源5.2沃平：感量为0.0001g和0.01g5.3周相萃取装置。5.4离心机：大于等于6000r/min。5.5旋涡混合器。5.6旋转蒸发器。5.7具塞离心管：聚四氟乙烯，50ml.。6试样制备与保存取500g代表性蜂主浆样品，在室温下解冻等样品全部融化后搅匀，将试样均分成两份，分别装人样品瓶中，密封，并标明标记。一份作为试验样。另份在18℃保存。在制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化7测定步骤7.1 提取称取2g试样（精确到0.01g）置于50mL具寒离心管中，加0.2mL.同位素内标混合标准溶液(150ng/mL）和10mL水，混匀，静置2min.再加甲醇至20ml，于旋涡混合器上以2000r/min混匀1min，以6000r/min离心5min，过滤，移取5.0ml.上清液加25mL水，混匀，待净化。7.2净化将溶液转移至asisHI.B固相萃取小柱中（4.12）奔之流出液，加5mI.水和5mI.甲醇水溶液（4.5）淋洗，抽干，用4ml.5%氨水甲醇洗脱（1.6）.控制流速1.ml./min~2mL/min，收集全部洗脱液于10ml.离心管中，将洗脱液用乙睛转移至浓缩瓶中在：45（以下水浴下减压浓缩至近干，用1.0ml乙睛甲醇-0.15%甲酸（2+20-78.体积比）溶解戏渣，混句.过0。45um，滤膜，供