SNT 2377-2009四纹豆象检疫鉴定方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2377—2009四纹豆象检疫鉴定方法Quarantine identification of Callosobruchus maculates (Fabricius)2009-09-02 发布2010-03-16 实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局数码防仪 SN/T 2377—2009前言本标准的附录 B和附录 C为规范性附录,附录 A和附录 D为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准负责起草单位：中华人民共和国吉林出人境检验检疫局。本标准参加起草单位：中华人民共和国浙江出人境检验检疫局、中华人民共和国湖北出人境检验检疫局、中华人民共和国丹东出人境检验检疫局、中华人民共和国江阴出人境检验检疫局、中华人民共和国内蒙古出人境检验检疫局、中华人民共和国大窑湾出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院。本标准主要起草人：魏春艳、吴志毅、罗雁非、肖成蕊、刘金华、王振华、张吉良、张永宏、刘和平、殷玉生、芦春梅、吴剑、王金丽、王坤兰、张生芳。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 SN/T 2377--2009四纹豆象检疫鉴定方法1 范围本标准规定了四纹豆象 Callosobruchus maculatus(Fabricius)的检疫鉴定方法。本标准适用于四纹豆象的检疫鉴定。2术语和定义下列术语和定义适用于本标准。2. 1雄虫阳基侧突parameres为雄性外生殖器的组成部分。位于阳基背方，由两叶组成;皇匙状，端部膨大。在不同的类群，两个阳基侧突有的在基部分离,有的部分愈合有的几乎完全愈合。2. 2雄虫阳茎、内阳茎及内阳茎骨化刺phallus,endophallus.andsits sclerites阳茎为雄性外生殖器的组成部分，位于阳基侧突腹面，呈棒状，基部膨大呈囊状(称为囊区)，端部呈瓣状(称外阳茎瓣)。阳茎又分为外阳茎和内阳茎。外阳茎为阳茎的外壳部分。内阳茎膜质，衬在外阳茎里面，当雄虫交尾时通过阳茎端孔外翻出来。内阳茎上着生大量骨化刺，排列成一定的图案，具有种的特异性，为豆象科昆虫种鉴别的重要依据之3原理中文名称：四纹豆象学名:Callosobruchus matulates (Fabricils)分类地位：鞘翅目（Coleoptera）豆象科Bruchidae）、瘤背豆象属（Callosobruchus)四纹豆象严重危害豇豆、豌豆、小豆、绿豆、鹰嘴豆、大豆扁豆、蚕豆、胡豆等多种豆类，广泛分布于世界热带及亚热带区（参见附录A）。雌虽喜欢在光滑的巨粒表面产卵，卵牢固地粘附在寄主种子表面。成虫寿命短，在最适条件下一般不多于12d。幼虫的发育在1粒种子内进行,共经历4 龄。四纹豆象以成虫或幼虫在豆粒中越冬，主要通过被害种子的调运进待远距离传播。4仪器、用具和试剂4.1仪器生物显微镜、体视显微镜、光照培养箱、烘箱。4.2用具测微尺、放大镜、剪刀、镊子、昆虫解剖针、培养皿、载玻片、盖玻片、酒精灯、烧杯、圆孔筛、标本盒、毛笔、标签等。4.3试剂及溶液配制4.3.1何燕尔封液：称取阿拉伯树胶粉30g于烧杯中，加人50mL蒸馏水。溶解后，加200mL水合三氯乙醛及20mL甘油,放置于55℃～60℃的干燥箱内。24h后，用玻璃棉过滤（仍在此温度干燥箱内完成)。4.3.210%氢氧化钾溶液或10%氢氧化钠溶液。4.3.3 70%乙醇。 SN/T 2377--20094.3.4还软液：在玻璃干燥器底部加入 2 cm厚洗涤干净的沙粒,加水并漫过沙粒约1 cm，并在水中加人几滴苯酚以防止标本腐烂。4.3.5乙醇-甘油保存液:量取75%乙醇100mL,加入0.5mL～1mL甘油。5实验室鉴定5.1表面检查仔细检查豆粒上是否有成虫的羽化孔，是否有黑幼虫蛀人点。5.2过筛检验根据豆粒的大小，选择适宜孔径的圆孔筛对豆粒过筛，检查筛下物内是否有豆象成虫。5.3饲养检验将可疑的被害豆粒装在玻璃瓶中,放置于30℃～32℃、相对湿度75%～90%的光照培养箱内,待成虫出现后进行鉴定。5.4镜检观察成虫的外部形态特征，首先确定是否属于瘤背豆象属，在此基础上再核对种的特征。5.5雄虫外生殖器标本制作必要时，要检查雄虫的外生殖器，操作时将雄虫腹部取下，放人10%氢氧化钾溶液或10%氢氧化钠溶液中，在酒精灯上加热煮沸5min后取出，在体视显微镜下解剖,将阳茎及阳基侧突分离，用何燕尔封液制片后在生物显微镜下观察。6形态特征6.1瘤背豆象属(Callosobruchus)成虫主要形态特征（见附录B)-触角弱锯齿状、锯齿状或栉齿状；一额区具明显的中隆脊;一前胸背板多为圆锥形,无侧脊，通常在基部中央有2个瘤突；-后足腿节膨扩，腹面有纵沟形成2条脊，内脊和外脊近端部各有1小齿；雄虫的臀板与体轴垂直；阳茎