SN_T 1105-2014大家白蚁检疫鉴定方法.pdf

S中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1105--2014代替SN/T1105--2002大家白蚁检疫鉴定方法Detection and identification of Coptotermes curvignathus Holmgren2015-05-01实施2014-11-19 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局wwCMJ15.房查真伪 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准大家白蚁检疫鉴定方法SN/T1105-2014*中国标准出版社出版北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029)北京市西城区三里河北街16号（100045）总编室：（010址中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本880×12301/16印张1字数26千字2016年1月第一版2016年1月第一次印刷印数11100*书号：155066·2-29348定价18.00元 SN/T 1105—2014前創言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准代替SN/T1105-一2002《大家白蚁检疫鉴定方法》。本标准与SN/T1105-一2002相比，主要技术变化如下：增加大家白蚁分子生物学鉴定方法；-增加大家白蚁寄主、分布、为害、与近似种的检索表（兵蚁)及特征图。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国厦门出人境检验检疫局、中华人民共和国珠海出入境检验检疫局。本标准主要起草人：庞金、方元炜、许彩芸、林振基、黄蓬英、张卫东、廖力、董文广、乐海洋、曾琪、国伟、周昱。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：SN/T1105—2002。1 SN/T 1105—2014大家白蚁检疫鉴定方法1范围本标准规定了大家白蚁Coptotermes curvignathusHolmgren的形态学和分子生物学检疫鉴定方法。本标准适用于大家白蚁的检疫和鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1卤fontane白蚁在头盖缝的汇合之处凹下或突起部分，是额线的开口处。3.2孔fontanelle hole前额中间的圆形开口。4大家白蚁基本信息学名：Coptotermes curvignathusHolmgren。异名：Coptotermes gestroi Oshima。Coptotermes robustus Holmegren。英文名：Rubbertreetermites。分类地位：等翅目Isoptera，鼻白蚁科Rhinotermitidae，乳白蚁属CoptotermesWasman。大家白蚁常随原木、锯木和木包装传播，其寄主、分布及生物学参见附录A。乳白蚁属在全世界已知共4o余种，属内形态与大家白蚁近似种有台湾乳白蚁C.formosanusShiraki、锡纳邦乳白蚁C.sinabangensiOshima、南亚乳白蚁C.travians（Haviland）、卡肖乳白蚁C.kalshoveniKemner、塞庞乳白蚁C.sepangensisKirshna、印缅乳白蚁C.gestroi（Wasmann）、菲岛乳白蚁C.vastatorLight和婆罗乳白蚁C.borneensisOshima，大家白蚁与近似种的区别参见附录B。5方法原理根据大家白蚁的为害状，在检疫现场或发生疑似大家白蚁的地方，取得卵、兵蚁、工蚁或成虫等。现1 SN/T1105-—2014场检疫如发现有白蚁的兵蚁，依据形态学特征进行鉴定。如未发现白蚁兵蚁，而有卵、工蚁或有翅成虫等时，利用大家白蚁ITS特异性扩增引物的常规PCR检测方法和实时荧光PCR检测方法，可准确、快速将大家白蚁与印缅乳白蚁、塞庞乳白蚁、台湾乳白蚁和婆罗乳白蚁4种乳白蚁区分开来。6器材和试剂6.1器材6.1.1形态学部分显微镜、解剖镜、树皮铲、手锯、油锯、铁锥、螺丝刀、小斧头、解剖刀、解剖针、镊子、培养Ⅲ皿、毛笔、养虫管、指形管。6.1.2分子生物学部分PCR扩增仪、实时荧光PCR仪、电泳仪、凝胶成像系统、离心机、台式离心机、核酸蛋白分析仪、烘箱、高压灭菌锅、电子天平、研钵、摇床、水浴锅、旋涡震荡器、冰箱、微量加样器（0.5uL，2uL，10uL，20μL，100μL,200μL，1000μL)、PCR反应管(0.2mL,0.5mL)。6.2试剂6.2.1形态学部分75%乙醇。6.2.2分子生物学部分实验用水、液氮、蛋白酶K（20mg/mL）、RNA消化酶、Tris饱和酚、PremixExTaq（2×）、三氯甲烷、异戊醇、异丙醇、75%乙醇、95%乙醇