SN_T 4401.1-2015临床检验标本中毒品成分的定性及定量分析方法 第1部分：氯胺酮.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4401.1-2015临床检验标本中毒品成分的定性及定量分析方法第1部分：氯胺酮Methods of qualitative and quantitative analysis for drug in clinical sample-Part 1 : Ketamine2015-12-04发布2016-07-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局hai刮涂层查真优 SN/T 4401.1—2015前言SN/T4401《临床检验标本中毒品成分的定性及定量分析方法》分为4部分：第1部分：氯胺酮；第2部分：甲基苯丙胺类毒品；第3部分：吗啡类毒品；第4部分：大麻类毒品。本部分为SN/T4401的第1部分。本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国福建出人境检验检疫局。本部分主要起草人：高博、曹洁、张建明、蔡怡珊、黄恩炯、肖武。I SN/T 4401.1—2015临床检验标本中毒品成分的定性及定量分析方法第1部分：氯胺酮1范围SN/T4401的本部分规定了人体尿液和血清中氯胺酮的三种测定方法，即气相色谱-质谱/质谱法（GC-MS/MS）、液相色谱-质谱/质谱法（LC-MS/MS）和气相色谱法［包括配氢火焰离子化检测器（GC-FID），配氮磷检测器（GC-NPD)]。本部分适用于人体尿液和血清中氯胺酮的定量测定：气相色谱-质谱/质谱法、液相色谱-质谱/质谱法同时适用于人体尿液和血清中氯胺酮的定性确证。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3气相色谱-质谱/质谱法(GC-MS/MS)3.1原理x.:试样在碱性条件下，用乙酸乙提取生物检材中的氯胺酮，采用多反应监测质谱扫描模式（MRM），用化合物的保留时间租质谱特征碎片离子丰度比定性，外标法定量。S3.2试剂与材料3.2.1实验用水为GB/T6682规定的二级水。3.2.2氢氧化钠：分析纯。3.2.3甲醇：色谱纯。3.2.4乙酸乙酯：分析纯。3.2.5氯胺酮标准品：CAS6740-88-1，纯度99.0%。3.2.6复氯胺酮标准储备液：准确称取10mg（精确到0.1mg）盐酸氯胺酮标准品于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，配制成浓度为1mg/mL标准样品储备液。于一18℃以下冰箱中避光保存--年。试验中根据需要稀释使用。3.2.7氮气：纯度≥99.999%。3.2.8氮气：纯度≥99.999%。3.3仪器及器材3.3.1气相色谱-质谱/质谱（GC-MS/MS)仪：配有电子轰击电离离子源（EI)。3.3.2氮气吹干仪。 SN/T 4401.1—20153.3.3离心机：转速不低于4000r/min。3.3.4分析天平：感量0.1mg。3.3.5超声波水浴。3.3.6涡旋混合器。3.3.7实验室常用玻璃器材。3.4样品前处理取尿液或血清1mL置于10mL具塞离心管中，用4mol/L氢氧化钠调pH13,用2mL乙酸乙酯分别萃取两次，以10000r/min离心3min，有机层合并转移至另一试管中，于40℃下氮气吹干，残留物用200μL甲醇溶解，取1μL进GC-MS/MS分析。3.5气相色谱-质谱/质谱测定3.5.1仪器参考条件包括：a）色谱柱：5%苯基甲基聚硅氧烷石英毛细管柱，30m×0.25mm（内径）×0.25μm，或相当者。b）流速：1.0mL/min。c).程序柱温：120℃保持1min，以20℃/min的速率升温至250℃，保持1min。d)进样口温度：250℃。e)接口温度：280℃。f)进样方式：分流。分流比：10：1。g)进样量：1μL。h)电离方式：电子轰击电离（EI）。i)电离能量：70eV。j)离子源温度：230℃。k)四极杆温度：150℃。1)碰撞气：氮气。m）扫描方式：多反应监测（MRM），定量离子m/180116.1（最优碰撞能量25V），定性离子m/z：180151（最优碰撞能量10V），m/z：180145.1（最优碰撞能量10V）。3.5.2标准曲线的绘制取空白样品按照3.4处理。用所得的样品溶液将氯胺酮标准储备液（3.2.6)逐级稀释得到的浓度为0.5μg/mL、1μg/mL、2μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、25μg/mL的标准工作液，浓度由低到高进样检测。以标准工作溶液浓度为横坐标，定量离子质量色谱峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线。标准溶液的GC-MS/MS多反应监测质量色谱图参见附录A中的图A.1。3.5.3定量测定待测样液中