SN_T 2922-2011出口食品中EPA和DHA的测定 气相色谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2922--2011出口食品中EPA和DHA的测定气相色谱法Determination of eicosapentaenoic acid(EPA)anddocosahexaenoic acid(DHA)in foods for export--Gas chromatography2011-05-31 发布2011-12-01 实施中华人民共和国发布BB国家质量监督检验检疫总局磁防 SN/T 2922--2011前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国广东出入境检验检疫局。本标准主要起草人：陈捷、叶弘毅、陈文锐、谢守新、林海丹。1 SN/T 2922—2011出口食品中EPA和DHA的测定气相色谱法1范围本标准规定了出口鱼油和鱼油复合胶囊制品中顺式-5，8，11，14，17-二十碳五烯酸（简称EPA）、顺式-4,7,10,13,16,19-二十二二碳木烯酸（简称DHA)的气相色谱测定方法。本标准适用于鱼油和鱼油复合胶囊制品中EPA、DHA含量的测定。2方法提要样品中EPA、DHA甘油酯和游离的EPA、DHA，经氢氧化钠甲醇溶液和三氟化硼甲醇溶液甲酯化，采用气相色谱附氢火焰离子检测器（FID)检测，内标法定量。3试剂和材料除另有规定外，试剂均为分析纯→水为去离子水3.1异辛烷。3.2 甲醇。3.3氢氧化钠。3.4氯化钠。3.5三氟化硼甲醇溶液：BF312%三氟化硼钾醇溶液3.6氢氧化钠甲醇溶液：0.5mol/L.称取2l0g氢氧化钠，加100mL甲醇溶解。3.7饱和氯化钠溶液：36g氟化钠，溶于1§oml.水中，3.8标准物质3.8.1二十三酸甲酯：CAS编号2433-97-8,纯度≥99.0%，内标物。3.8.2顺式-5,8,11,14，17-二+碳五烯酸甲酯，CAS编喜2734-47-6，纯度≥99.0%。3.8.3顺式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸甲酯：CAS-编号301-01-9,纯度≥99.0%。3.9标准溶液配制3.9.1二十三酸甲酯储备液：准确称取适量二十三酸甲酯（精确到0.0001g），用异辛烷溶解，配制成浓度为1.00mg/mL的内标储备液。3.9.2EPA甲酯储备液：准确称取适量EPA甲酯（精确到0.0001g），用异辛烷配制成浓度为10.0mg/mL的标准储备液。3.9.3DHA甲酯储备液：准确称取适量DHA甲酯（精确到0.0001g），用异辛烷配制成浓度为10.0mg/mL的标准储备液。注：上述标准溶液应于一18℃冰箱中保存，保存期六个月。4仪器和设备4.1气相色谱仪：配有火焰离子化(FID)检测器。 SN/T 2922—20114.2天平：感量0.0001g。4.3涡旋振荡器。4.4恒温箱。4.5氮气吹干仪。4.6顶空进样瓶或玻璃试管：25mL,带聚四氟乙烯垫旋盖。4.7 玻璃刻度试管:5.0mL,具塞。5测定步骤5.1准确移取 2.0 mL二十三酸甲酯(3.9.1)内标液(相当于内标物 2.0 mg)于顶空进样瓶中，用氮气吹干，待用。如果不即时使用，应冷冻储存。5.2称取试样（胶囊内含物)0.02g(精确至0.0001g)于含有内标的顶空进样瓶（5.1)中，加1.5ml0.5mol/L氢氧化钠甲醇溶液（3.6），充人氮气，加盖密封，涡旋振荡混匀，100℃下加热5min，冷却，加2mL三氟化硼甲醇溶液（3.5），充入氮气，加盖密封，涡旋振荡混匀，100℃下加热30min，冷却至30℃～40℃，注人1mL异辛烷，趁热涡旋振荡30s，再注人5mL饱和氯化钠溶液（3.7），涡旋振荡，冷却至室温，静置分层，将异辛烷层移人玻璃刻度试管，充人氮气，加盖。在水相中再加人1mI异辛烷，重复萃取一次，合并异辛烷提取液，通氮气浓缩并定容至 1.0mL,待测。5.3标准系列工作液配制：准确移取 EPA甲酯（3.9.2)和DHA甲酯（3.9.3)适量（分别相当于EPA甲酯和 DHA 甲酯0.02 mg、0.5 mg、1.0 mg、2.0 mg、4.0 mg、10 mg）,按5.2操作。配制成标准系列工作液,EPA 甲酯和 DHA 甲酯的浓度依次为 0.02 mg/mL、0.5 mg/mL、1.0 mg/mI、2.0 mg/mL、4.0 mg/mL、10.0 mg/mL,内标浓度为 2.0 mg/mL。5.4　测定5.4.1气相色谱条件色谱柱:DB-23 毛细管柱,60m×0.25mm(内径）×0.15μm,或性能相当者。5. . 1. 2 升温程序:150 ℃(2 min)-3 ℃/mm-200 ℃ 2/mm-220 ℃(2 min)2) 25℃/min230 °℃C(2