SN_T 3224-2012动物传染病ELISA检测技术确认规范.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3224—2012动物传染病ELISA检测技术确认规范Protocol for validation of ELISA for thediagnosis of animal infectious/contagious diseases2013-05-01实施2012-10-23 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 3224—2012前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准修改采用了世界动物卫生组织（OIE)《陆生动物诊断试验和疫苗手册》（2010版）中1.1.4/5章“感染性疾病诊断方法确认原理和方法”。本标准与OIE《陆生动物诊断试验和疫苗手册》（2010版）中1.1.4/5“感染性疾病诊断方法确认原理和方法”相比，主要技术差异如下：规定了如何对于非标准方法、实验室设计（制定)的方法、超出其预定范围使用的标准方法、扩充和修改过的标准方法进行确认，不涉及方法建立过程；-不涉及诊断敏感性和诊断特异性；一一未涉及确认后如何得到国际认可。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口，本标准起草单位：中华人民共和国北京出人境检验检疫局、中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局、中华人民共和国江苏出人境检验检疫局、北京市兽药监察所、中国合格评定认可委员会。本标准主要起草人：马贵平、李冰玲、史喜菊、郭志红、孙颖杰、姜焱、陶雨凤、李炎鑫。 SN/T 3224—2012引言可靠的检测方法要求与检测领域内的所有的国际和国家的法规的要求一致。兽医诊断实验室的认可活动只有在实验室的所有方法都得到充分确认的前提下才有意义。经过认可的实验室应该可以给出具有高度再现性的检测结果，但是如果方法确认的过程不恰当，试验结果同样可以对动物的感染状态做出错误判断。为使一个试验方法被适当应用，方法应被充分确认，确认应遵循（IE诊断手册的确认章节的原则进行。方法确认是实验室质量体系的一个组成部分，其过程应该按照实验室质量管理体系的要求进行。确认是为了证明方法适用于预期目的。如果方法的预期目的是用于动物抗体活性的普查（筛选方法），方法就需要有很高的敏感性，以达到尽可能地检测出感染的动物；如果方法的预期目的是用于确诊试验，那么就需要方法具有高的特异性。如果这两个目标都不能达到，那么就需要对试剂进行校准或替代，或者放弃这种方法。诊断敏感性和诊断特异性是动物传染病检测技术的重要指标，由于诊断敏感性和诊断特异性的评估需要特定数量的参考动物，并且要知道这些参考动物的背景、感染状态和在目标动物群的感染状态。在进出境检验检疫中，由于方法应用的目标动物群来源于不同国家和地区，因此很难做到对诊断敏感性和诊断特异性进行评估，因此在本标准中未涉及诊断敏感性和诊断特异性。Ⅱ SN/T 3224--2012动物传染病ELISA检测技术确认规范1范围本标准规定了动物传染病ELISA检测技术确认的重复性、再现性、敏感性、特异性、稳健性等方法性能评价的各个要素。本标准适用于动物传染病检测的ELISA方法的确认。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T27025检测和校准实验室能力的通用要求(ISO/IEC17025:2005,IDT)3术语和定义GB/T27025界定的以及下列术语和定义适用于本文件3. 1方法确认validation证实经过适当方式建立、优化和标准化的方法适用于预期目的的过程。确认包括对试验的分析和诊断表现特性进行评估的过程。3.2样品sample来自于目标动物的用于检测的物质。3.3参考动物reference animal/地区的历史/感染状态都已知的动物。动物目标疾病/感染以及来源国家！3. 4参考物质reference materials不确定度已知的可以追溯到国际标准的物质，在基质相符的情况下，可以用来同时评估所有来源的偏差（方法、实验室、和实验室内偏差）。3. 5标准方法 standard test method国际和国内认可的最好的方法，或者是知名刊物提供的可应用的最好方法。3. 6分析特异性analytical sensitivity,Asp方法不与其他分析物发生交叉反应的程度。3.7分析敏感性analytical specificity , Ase目标分析物的最小可检出量，即方法的最低检出限。 SN/T 322420123.8再现性reproducibility用相同的方法、在不同的条件下对同一样品检测获得的单个结果之间的一致程度。不同的条件指不同操作者、不同实验室、不同或相同的时间。3.9生 repeatability重复性用相同的方法、在