NY_T 2360-2013十字花科小菜蛾抗药性监测技术规程.pdf

S 65.10017NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 2360—2013十字花科小菜蛾抗药性监测技术规程Guideline for insecticide resistance monitoring ofPlutella xylostella (L.) on cruciferous vegetables113-05-20发布2013-08-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T2360-2013前 言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草本标准由农业部种植业管理司提山并归口。本标准起草单位：全国农业技术推广服务中心、广东省农业科学院植物保护研究所、广东省农业有害生物预警防控中心。本标准主要起草人：邵振润、冯夏、张帅、李振宇、黄军定、陈焕瑜、胡珍娣一 NY/T 2360—2013十字花科小菜蛾抗药性监测技术规程1范围本标准规定了没叶法监测小菜蛾[Plutellurylostellu（L.）抗药性的方法。本标准适用于小菜蛾对杀虫剂抗药性监测。2术语与定义下列术语和定义适用于本义件。2. 1抗药性insecticide resistance内了杀虫剂的使用.在昆虫或螨类种群中发展准可以遗传给后代的对杀死止常种群药剂剂量的忍受能力。2. 2F, 代 F, generation从田间采集害虫的幼虫或蛹.室内饲养.繁殖后得到的第一代幼虫。2. 3 susceptibility baseline敏感基线通过生物测定方法得到的害虫敏感品系（或种群）对杀虫剂的剂量反应曲线。2. 4浸叶法leaf-dippingmethod将浸过药液的叶碟置}含有琼脂或保湿滤纸！，接人靶标昆虫进行的生物测定方法。3试剂与材料试剂为分析纯试剂。3.1生物试材小菜蛾：田间采集，经室内饲养的F，代3龄幼虫。供试植物：末被药剂污染的甘蓝（Brussicuuleraceu）。3.2试验药剂原药或母药。4仪器设备4.1实验室通常使用仪器设备4.2特殊仪器设备电子天平（感量0.1mg）；培养Ⅲ（直径7cm.高1.5cm）；养虫笼（长40cm×宽40cm×高40cm）；烧杯（500ml.）；移液管或移液器（200μl,1000μl.,5000μl.）；容量瓶（10ml、25ml）； NY/T2360—2013恒温培养箱、恒温养虫室或人工气候箱5试验步骤5.1试材准备5.1.1试虫试虫采集选当地具有代表性的菜田2块～3块.每块田随机多点采集生长发育较一致的小菜蛾高龄幼虫或蛹，每地采集幼虫或200头以上·置于事先放置的寄主植物叶片的养虫盒中，供室内饲养。试虫饲养采集的幼虫在室内用寄主植物饲养到成虫分批产卵，取F，代3龄初期幼虫供试。5.1.2供试植物使用新鲜、洁净、无农药污染的H蓝叶片，并制成直径6.5cm的圆片供试。5.2药剂配制将药剂原药或母药溶于有机溶剂（如丙酮、乙醇等），按要求配成一定浓度的母液。5.3处理方法用含0.05%TritonX-100的蒸馏水稀释母液成系列梯度浓度（通过预实验确定药剂的浓度系列范闹，最低浓度时死亡率小于20%，最大浓度时死亡率大于80%），每质量浓度药液量不少于200mL。将清洗十净的甘蓝叶片浸于不同浓度的溶液中10，取出后在室内晾下至表面无游离水。用0.05%TritonX-100水溶液没渍的叶片作为对照。将晾干的叶片放入培养Ⅲ中，用滤纸或琼脂保混，接入3龄幼虫，每个培养Ⅲ中10头，重复4次。5.4结果检查根据杀虫剂的速效性分别于接虫后的48h～96h检查。啶虫隆等昆虫生长调节剂、Bt等微生物制剂，于药后96h调查.速效性好的药剂于药后48h调查。以小毛笔或尖锐镊子轻触虫体，不能协调运动的个体视为死亡。6数据统计与分析6.1计算方法根据调查数据.计算各处理的校正死亡率。按式（1)和式（2)计算，计算结果均保留到小数点后两位。KP, = X 100(1)N式中：P—死亡率.单位为百分率（%）；K表示每处理浓度总死亡虫数，单位为头；N-表示每处理浓度总虫数，单位为头。P,-PP, -X100:（2）100-P,式中：P2校正死亡率，单位为百分率(%)；P, 处理死亡率，单位为百分率（%）；-Pe空白对照死亡率，单位为百分率（%）。若对照死亡率5%，无需校正；对照死亡率在5%～20%之间，应按式（2)进行校正；对照死亡：率20%，试验需重做。2 NY/T2360—20136.2统计分析采用SAS、POLO、PROBIT、DPS、SPSS等软件进行机率值分析.求出每种药剂的毒力回归方程式、LCs值及其95%置信限、b值及其标准误。7抗药性水平的计算与评估7.1敏感毒力基线小菜蛾对部分杀虫剂的敏感毒力基线（参见附录A）。7.2抗药性水平的分级标准见衣1。表1抗药性水平的分级标准抗药性水平分级抗性倍数，倍低水平抗性RR≤10.0中等水平