SNT 1974-2007进出口水产品中亚甲基蓝残留量检测方法 液相色谱-质谱/质谱法和高效液相色谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T出口水产品中亚甲基蓝残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法和高效液相色谱法Determination of methylene blue residues inaquatic product for import and export-LC-MS/MS and HPLC method2007-08-06发布2008-03-01实施中华人民共和国发布启接盗意专市国家质量监督检验检疫总局数码防伪 SN/T 1974—2007前言本标准的附录 A、附录 B、附录 C均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国江苏出入境检验检疫局、中华人民共和国福建出人境检验检疫局、中华人民共和国上海出入境检验检疫局。本标准主要起草人：吴斌、徐锦忠、陈惠兰、杨方、丁涛、林宏、郭德华、黄娟。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 1974---2007进出口水产品中亚甲基蓝残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法和高效液相色谱法1范围本标准规定了水产品中亚甲基蓝残留量测定的液相色谱-质谱/质谱和高效液相色谱检测方法。本标准适用于鱼、虾及其制品中亚甲基蓝残留的测定和确证。2　规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3试样制备和保存3.1试样制备鳗鱼取连皮的鱼肉，将皮、肉分离后取鱼皮置于微波炉中加热30 s后连同鱼肉、虾、鳗鱼制品取所有可食部分一并放入高速组织捣碎机均质，充分混匀，装人清洁容器内，并标明标记。制样操作过程中必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。3.2试样保存试样于18℃以下保存。第一法　液相色谱-质谱/质谱法4　方法提要试样中的残留物用乙腈-乙酸钠缓冲溶液提取，液液分配到二氯甲烷层，中性氧化铝和阳离子固相萃取小柱净化，用串联质谱在电喷雾-选择反应监测离子的模式下，进行质谱定量和确证，外标法定量。5试剂和材料除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。5.1 甲酸:HPLC级。5.2甲醇:HPLC级。5.3 乙腈。5.4 二氯甲烷。5.5中性氧化铝:80目～120目。5.610%甲酸甲醇溶液：量取10mL甲酸加人90mL甲醇中混匀。5.720%二甘醇水溶液：量取200mL二甘醇加入800mL水中混匀。5.8乙酸钠缓冲溶液(0.1 mol/L,pH=4.5）:称取8.2 g无水乙酸钠溶解于1000 mL水中,冰乙酸调pH到 4.5。 SN/T 1974-20075.9对甲苯磺酸溶液(1.0 mol/L):称取 17.2 g一水对甲苯磺酸,并用水稀释至100 mL。5.1030%甲醇溶液：量取30mL甲醇加人70mL水中混匀。5.11阳离子交换萃取小柱：WCX,60 mg/3 mL或相当者。5.12中性氧化铝萃取小柱:LC-alumina-N,500 mg/3mL或相当者。5.13滤膜:0.45 μm,有机相。5.14亚甲基蓝(CAS号：7220-79-3,分子式:Cl。H1:CINS)标准品，纯度大于等于 96%。5.15标准贮备液：准确称取适量的亚甲基蓝，用30%甲醇溶液（5.10)分别配制成100μg/mL的标准贮备液,再用该甲醇溶液（5.10)稀释配制1.0μg/mL的标准溶液，2℃～8℃避光保存。5.16标准工作溶液：用1μg/mL的标准溶液，用30%甲醇溶液（5.10）分别稀释成200.0 ng/mL，100.0 ng/mL,50.0 ng/mL,20.0 ng/mL,10.0 ng/mL 五个浓度,现用现配。6仪器和设备液相色谱-质谱/质谱联用仪，配有电喷雾(ESI)源。6.16.2离心机:4 000 r/min。6.3涡旋混合器。6.4　无油真空泵。6.5旋转蒸发仪。6.6固相萃取装置。6.7高速均质器。6.8氮气吹干仪。7 测定步骤7.1提取称取5g均匀样品(精确到0.9rg)手100mL离心管中,加入5g 中性氧化铝,再依次加人1.0 mL对甲苯磺酸(5.9)溶液、4.0mL乙酸钠缓冲溶液（5.8），涡旋30s。人8mL乙腈，10000r/min均质2min,离心5min(2000 r/minl,将上清液转移到50 ml-离心管中，用 4.0mL乙腈重复提取残渣一次，合并上清液。于离心管中加尽8mL,二甘醇溶液（5.7)，1dmL三氯甲烷，涡旋1min，离心5min（2000r/min），收集下层有机于浓