NY 571-2002马腺疫诊断技术.pdf

ICS 11. 220B 41NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 571~—2002马腺疫诊断技术Diagnostic techniques for strangles2002-08-27 发布2002-12-01实施中华人民共和国农业部发布 中华人民共和国农业行业标准马腺疫诊断技术NY/T 571--2002米中国标出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045电话：6852394668517548中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经售新华书店北京发行所发行*开本880×12301/16印张1/2字数10千字2002年12月第一次印刷2002年12月第一版印数 1-1500x NY/T 571—2002前言马腺疫是马、骤、驴的一种急性传染病，典型症状为发热、上呼吸道及咽喉黏膜呈现卡他性炎症，颌下淋巴结表现急性化脓性炎症。农业部(1999)规定马腺疫为二类动物疫病，本标准采用的诊断技术系我国多年来行之有效，且为国际公认的方法。本标准的附录A为规范性附录。本标准由农业部畜牧兽医局提出。本标推由全国动物检疫标准化技术委员会归口。本标准起草单位：中国人民解放军军需大学。本标准主要起草人：王世若、王兴龙、沈广、雷连成。 NY/T 571—2002马腺疫诊断技术1范围本标规定了马腺疫临床检查及病原菌分离培养鉴定的技术要求。本标准适用于马属动物产地、集散地、国境口岸、饲养及使用单位（含个体)马腺疫的诊断及检疫。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。GB4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂3临床检查3.1检查前准备检查用主要药械有体温计、听诊器、保定器、胶手套、线手套、3%来苏儿、0.1%新洁尔灭等。术者穿全套工作服，戴胶手套及线手套；助手穿工作服。3.2检查方法由助手保定被检马，术者按常规方法做临床检查，重点检查鼻腔和颌下淋巴结。3.3临床特征3.3.1 一过型腺疫鼻腔黏膜潮红，流出浆液性或黏液性鼻液,颌下淋巴结轻度肿胀。3.3.2典型腺疫体温 39℃～~41℃，鼻腔流出黏性至脓性鼻液，颌下淋巴结肿大，表面凹凸不平，触之硬实，界限清楚，如鸡蛋大甚至拳头大，周围发生炎症时,肿胀加剧，充满于整个下颌间隙，界限不清，热痛明显，以后随着炎症的发展，局部组织肿胀化脓，肿胀完全成熟，自行破溃，流出大量黄白色黏稠脓汁，体温恢复正常,随后,创内肉芽组织新生,逐渐愈合。病程约2周～3周。3.3.3恶性型腺疫如果病马抵抗力很弱，则马腺疫链球菌可由颌下淋巴结的化脓灶转移到其他淋巴结，形成化脓灶，甚至转移至肺和脑等器官,发生脓肿,体温多稽留不降，常因极度衰弱或继发脓毒败血症死亡。3.3.4临床诊断结果根据3.3.1~~3.3.3项描述的临床症状，初步确定患马是否发生了马腺疫及其型别。4细菌学检查4.1器材恒温箱、高压蒸汽灭菌器、显微镜、试管架、灭菌小试管、5mL灭菌注射器、煮沸消毒器、外科剪、棉棒、镊子、载玻片、铂金耳、酒精灯等。4.2培养基及实验动物4.2.1培养基：10%血清肉汤、5%～10%血清琼脂平板、5%绵羊血液琼脂平板及美蓝牛乳培养基，配1 NY/T 571—2002制方法见附录A（规范性附录）。4.2.2昆明系小鼠，体重17g～20g，清洁级。4.3病料标本采集病马颌下淋巴结未破溃脓肿以碘酒及酒精消毒后，用注射器吸取脓汁注人灭菌小试管中；已破溃的脓肿，以灭菌生理盐水浸湿的棉棒蘸取脓汁或鼻腔分泌液放于灭菌小试管中，立即检查，或放4℃冰箱中保存待检。4.4直接镜检4.4.1操作方法将病料标本涂于载玻片上，干燥、固定按GB4789.28-1994中2.2条规定进行革兰氏染色。4.4.2结果观察马腺疫链球菌的形态及染色特征是：在脓球间散布着由几个甚至上百个球菌组成的波浪状弯曲的长链条，各菌大小不等，多呈扁球状，直径约1μm，菌体着色不均，革兰氏阳性。4.5分离培养4.5.1操作方法用铂金耳钓取病料，接种于10%血清肉汤（见第A.1章)做增菌培养，接种于5%～10%血清琼脂平板（见第A.2章）及5%绵羊血液琼脂平板（见第A.3章）做分离培养，于37℃C恒温箱中孵育24h～72 h.4.5.2结果观察观察到下述结果，符合马腺疫链球菌培养特征：a）10%血清肉汤：培养后，生成长链条状，24h肉汤轻度混浊，48h后长成长链条状的菌体缠绕一起，呈棉絮状沉于试管底，72h以后上清液清朗。b）5%～10%血清琼脂：形成圆形、透明、闪光、中央微隆起、表面光滑的露珠样小菌落。强毒株的菌落表面常呈颗粒状