SNT 1752-2006进出口动物源性食品中二苯乙烯类激素残留量检测方法 液相色谱串联质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1752—2006进出口动物源性食品中二苯乙烯类激素残留量检验方法液相色谱串联质谱法Inspection of stilbenes residues in foodstuffs ofanimal origin for import and export--Liquid chromatography mass spectrometry method2006-08-16 实施2006-01-26 发布中华人民共和国发布仔2国家质量监督检验检疫总局数码防伪 SN/T 1752-2006前言本标准的附录 A、附录 B均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局。本标准主要起草人：许泓、林安清、古珑、唐丹舟、何佳。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 1752—2006进出口动物源性食品中二苯乙烯类激素残留量检验方法液相色谱串联质谱法范围1本标准规定了进出口动物源食品中二苯乙烯类激素残留量检验的抽样、制样和液相色谱串联质谱测定及确证方法。本标准适用于鸡肉、鱼及虾中二苯乙烯类激素残留量的检验。2抽样和制样2.1检验批以不超过2500件为一检验批。同一检验批的商品应具有相同的特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。2.2抽样数量见表1。表 1批量/件最少抽样数/件1~25126 ~ 1005101~25010 2511 000171 001~2 500202.3抽样方法按2.2规定的抽样件数随机抽取，逐件开启。动物源食品：从每件中取一袋作为原始样品，其总量不少于2kg，放入清洁容器内，加封后，标明标记，及时送交实验室。如每件中无小包装或有小包装但每袋质量超过2kg者，则可用锋利刀（用酒精灭菌过)在抽出的包件中，每件割取不少于100g，混合后置于清洁容器内，作为混合原始样。混合原始样的质量不少于2kg。加封后，标明标记，及时送交实验室。2.4试样制备动物源食品：从所取全部样品中取出有代表性样品约1kg，充分搅碎，混匀，均分成两份，分别装人洁净容器内。密封作为试样，标明标记。2.5试样保存将试样于一18℃冷冻保存。注：在抽样和制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。1 SN/T 1752—20063测定方法3.1 方法提要用叔丁基甲基醚和乙酸盐缓冲液分别提取试样中残留的二苯乙烯类激素，经硅胶柱净化，用液相色谱串联质谱法测定和确证，内标法定量。3.2试剂和材料除另有规定外，试剂均为分析纯，水为去离子水，3.2.1叔丁基甲基醚：色谱纯。3.2.2 乙酸。3.2.3 乙酸钠(CH,COONa· 3H,O)。乙酸盐缓冲液(0.2mol/L,pH=5.2)：称取2.52g乙酸(3.2.2)和12.95g乙酸钠(3.2.3)溶解3.2.42于800mL水中，用氢氧化钠溶液(3.2.6)调节pH值至.5:2±0.1,加水定容至1000mL。3.2.5氢氧化钠。3.2.6氢氧化钠溶液（3mol/L）：称取120g氢氧化钠（3.2.5)溶于1000mL去离子水中。甲醇:色谱纯。3.2.7乙腈：色谱纯。3.2.823.2.9乙酸乙酯。正已烷。3.2.10二氯甲烷。3.2.11溶解液：正已烷十二氯甲烷（60十40）。3.2. 12：淋洗液：乙酸乙酯+正己烷（6+94）。.14洗脱液：乙酸乙酯+正已烷（25+75）。3.2.15β-葡糖苷酸酶：H-2型，含β-葡糖苷酸酶124400 units/mL,每毫升硫酸酯酶3610个。3.2.16二苯乙烯类激素标准品：已烯雌酚（Diethylstilbestrol，DES)纯度≥99%；已烷雌酚（Hexes-trol,HEX)纯度≥98%;双烯雌酚(Dienoestrol,DEN)纯度≥98%。3.2.17二苯乙烯类激素标准溶液：分别准确称取适量的DES、DEN和HEX标准品，用甲醇(3.2.7)配制成1mg/mL标准贮备溶液。再根据需要以甲醇配制成不同浓度的混合标准溶液作为标准工作溶液，保存于4℃冰箱中，可使用3个月。3.2.18内标标准品：氛代已烯雌酚(DES-d8)纯度≥98%。3.2.19内标标准溶液：准确称取适量DES-d8标准品，用甲醇(3.2.7)配制成1mg/mL标准贮备溶液。再以甲醇稀释成适用浓度的内标工作溶液，保存于4℃冰箱中，可使用3个月。3.2.20基质提取液：空白样品，除不加人1mL.DES-d8内标工作溶液（3.2.19)外，其他操作3.4.1及3.4.2处理后得到的溶液。3.2.21基质标准工作溶液：将标准工作溶液(3.2.17)及内标溶液（3.2.19)混合后在氮吹仪中吹干，以基质提取液溶解,涡旋30 s 后即为基质标推工