WST 28-1996尿中砷的二乙基二硫代氨基甲酸银——三乙醇胺分光光度测定方法.pdf

中华人民共和国卫生行业标准尿中砷的二乙基二硫代氨基甲酸银WS/T 28-1996三乙醇胺分光光度测定方法Urine---Determination of arsenic-Silverdiethyldithiocarbamate-triethanolamine-Spectrophotometric method1主题内容与适用范围本标准规定了尿中的分光光度测定方法。本法最低检测浓度为0.025mg/L。本标准适用于正常人和接触砷化物工人尿中砷含量的测定。2原理尿样经硫酸-硝酸-高氯酸消化后，在碘化钾和酸性氯化亚锡存在下，使五价砷还原成三价砷，然后与新生态氢反应，生成砷化氢气体，该气体吸收于二乙基二硫代氨基甲酸银（DDC-Ag)-三乙醇胺的三氯甲烷溶液中，生成红色络合物，比色定量。3仪器3.1砷化氢发生装置，见下图。3.2分光光度计，10mm比色杯。3.3聚乙烯瓶或玻璃瓶，100ml。3.4尿比重计。砷化氢发生器a一150mL三角烧瓶；b磨口塞；c一乙酸铅脱脂棉；d一聚乙烯塑料管，e-玻璃导管；f--刻度离心管：g一吸收液；h一样品中华人民共和国卫生部1996-10-14批准1997-05-01实施 WS/T 28-19964 试剂本标准所用试剂除另有说明者外，均为分析纯试剂。4.1实验用水：为蒸馏水。4. 2 硫酸,P2o= 1. 84 g/mL。4.3硝酸,P20=1.42g/mL。4.4高氯酸,P20=1.67g/mL。4.5硫酸溶液，1十1。4.6三氯甲烷。4.7无砷锌粒，10～20目，蜂窝状。4.8饱和草酸铵溶液。4.9碘化钾溶液，150g/L。4.10氯化亚锡溶液：溶解40g氯化亚锡（SnCl2·2H2O)于40mL盐酸（p2o=1.19g/mL)中，用水稀释至100mL。4.11乙酸铅棉花：将脱脂棉浸入乙酸铅溶液（100g/L）中，沥干后烘干备用。4.12二乙基二硫代氨基甲酸银-三乙醇胺三氯甲烷吸收液：溶解0.25g二乙基二硫代氨基甲酸银于约20mL三氯甲烷中，加1mL三乙醇胺，再用三氯甲烷稀释至100mL，放置过夜，过滤，保存于棕色瓶中。4.133砷标准溶液：溶解1.3200g三氧化二砷（As20O3，预先在105℃烘干2h）于5mL氢氧化钠溶液（200g/L)中，用水稀释至1000mL，此溶液1mL=1mgAs3+。临用前，将上述标准液稀释成1mL=0.01mgAs3+的标准溶液。4.14质控样：用加标的模拟尿、接触者混合尿或加标的正常人混合尿作质控样。5采样、运输和保存用洁净的塑料瓶或玻璃瓶收取接触砷化物工人班末尿至少100mL，测量比重，在4℃冰箱中可保存二周。6分析步骤6.1样品处理取25mL尿样（比重1.010~1.030之间）于三角烧瓶中，加2mL硫酸（4.2)和3mL硝酸（4.3），加热至液体出现棕黄色，冷却后加1mL硝酸（4.3)和0.5mL高氯酸（4.4）加热至冒白烟，溶液应无色透明，否则补加硝酸，继续加热处理。冷却后，加2mL水和4mL饱和草酸铵溶液，加热至冒白烟，持续数分钟，但不得蒸干。放冷。6.2标准曲线的绘制6.2.1取6个150mL三角烧瓶，按下表配制标准管。砷标准管的配制管号0132450砷标准溶液（4.13），mL0.100.300.501. 001.50水,mL3029.9029.7029.5029. 0028.5005As的含量，μg310156.2.2加2mL碘化钾溶液（4.9），混匀，放置5min，再加1mL氯化亚锡（4.10）溶液，混勾后放置15min，然后加4g无砷锌粒（4.7），立即塞上装有乙酸铅棉花的导气管，使产生的砷化氢气体通入盛有 WS/T28-19965mL吸收液（4.12)的离心管中，反应45min后，取下离心管，用三氯甲烷补足至5mL。于520nm处测其吸光度。以砷含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。6.3样品测定样品经消化处理后放冷，加30mL水，3mL硫酸溶液（4.5），然后按6.2.2条操作，测定吸光度，在标准曲线上查出砷含量。在测定前后以及每测定10个样品后，测定一次质控样。7 计算7.1按式(1)计算尿样换算成标准比重(1.020)下的浓度校正系数(k)。1.020-1.000k(1)实测比重－1.0007.2按式(2)计算尿中的浓度。·kX=(2)V式中：X-尿中砷的浓度,mg/L;由标准曲线查得的碑含量，μg;mV分析时所取尿样体积，mL。8说明8.1本法检测限为0.025mg/L；测定范围1~15μg；精密度：CV=1.8%~5.1%（1~5μg，n=6)，准确度：中毒病人尿样加标回收率=91.0%～94.4%（加标量为1，5，7uμg，n=6）。8.2取样容器要经1十9硝酸溶液浸泡12h，以去除离子干扰及防止污染。8.3金属锌的表面