NY_T 1672-2008绵羊多胎主效基因FecB分子检测技术规程.pdf

ICS 65.020.30B 44NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1672-2008绵羊多胎主效基因FecB分子检测技术规程Technical specification of molecular detectionfor prolificacy major gene Fec in sheep2008-08-28 发布2008-10-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T 1672-2008前言Booroola(FecB)基因是在绵羊中识别出的第一个高繁殖力主效基因。FccB基因的遗传效应是增加排卵数和产羔数。Booroola绵羊骨形态发生蛋白受体IB基因高度保守的胞内激酶信号区域发生了·A746G突变，导致所编码的249位氨基酸由谷氨酰胺(Q)变成了精氨酸(R)。研究表明，该突变与Booroola母羊的高繁殖力密切相关。通过检测绵羊是否携带高繁殖力主效基因FecB，可以加速我国绵羊多胎品系的选育步伐。特制定本标准。本标准由中华人民共和国农业部畜牧业司提出。本标准由全国畜牧业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所。本标准起草人：储明星、叶索成、方丽、刘忠慧、彭志兰、张跟喜、贾立华、孙洁、冯涛。I NY/T 1672—2008绵羊多胎主效基因FecB分子检测技术规程1范围本标准规定了绵羊多胎主效基因Fcc的分子检测方法。本标准适用于绵羊多胎主效基因Fcc的分子检测。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。GB/T6682分析试验室用水规格和试验方法GB/T19915.9猪链球菌2型溶血素基因PCR检测方法SN/T1193基因检验实验室技术要求3术语、定义和缩略语下列术语、定义和缩略语适用于本标准。3. 1多胎 prolificacy指一次分娩产出两个或两个以上胎儿。3. 2FecBFec是在布鲁拉美利奴（BooroolaMerino)绵羊中发现的能增加排卵数和产羔数的一个常染色体突变基因，是在绵羊中识别山的第一个高繁殖力主效基因，该主效基因已被绵羊和山羊遗传命名委员会定名为FccB（即Fcc二fccundity，B=Booroola）。高繁殖力Fcc基因被定位到绵羊6号染色体上对应于人染色体4q22～23的区间，骨形态发生蛋白受体IB(boncmorphogcncticprotcinrcceptorIB，BMPRIB)基因位于该区间。Booroola绵羊BMPR-IB基因高度保守的胞内激酶信号区域发生了A746G突变，导致所编码的249位氨基酸由谷氨酰胺(Q)变成了精氨酸（R）。研究表明，该突变与Booroola母羊的高繁殖力密切相关。FccB即BMPR-IB基因的746G或249R，Fcc+即BMPR-IB基因的746A或249Q。两个FecB拷贝的携带者用FccFccB表示，简记为BB，一个FecB拷贝的携带者用FccBFcc+表示，简记为B十，非携带者用Fcc+Fcc+表示，简记为十十。个FccB拷贝增加排卵数1.3枚～1.6枚，两个FecB拷贝增加2.7枚～3.0枚；携带一个FccB拷贝的母羊产羔数增加0.9只～1.2只，携带两个FecB拷贝的母羊产羔数增加1.1只～1.7只。3. 3主效基因major gene主效基因是指对某一数量性状(或阈性状)的表型值产生较大效应的单个基因或基因座。3.4限制性内切酶restrictionendonuclease限制性内切酶是一类能识别双链DNA分子中特定核苷酸序列，并由此切割DNA双链的核酸内切酶。1 NY/T 1672--20083.5限制性片段长度多态性restrictionfragmentlengthpolymorphismRFLP)限制性片段长度多态性是根据基因组上限制性内切酶的酶切位点核苷酸发生突变，或酶切位点之间发生核苷酸的插人、缺失而导致酶切片段长度发生变化，对基因突变进行检测的一种方法。3. 6单链构象多态性singlestrandconformationpolymorphism（SSCP）单链构象多态性是根据单链DNA片段在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳中所呈现的不同带型来检测基因突变的一种方法。DNA片段中的一个核苷酸发生改变可能会影响其单链的空间构象。空间构象有差异的单链DNA分子在聚丙烯酰胺凝胶中呈现不同的带型，据此可分辨不同的基因型。3.7缩略语3.7.1 PCR：polymerasc chain rcaction，聚合酶链式反应3.7.2 DNA：deoxyribonucleic acid