SNT 2223-2008进出口动物源性食品中硫粘菌素残留量检测方法 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2223--2008进出口动物源性食品中硫粘菌素残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法Determination of tiamulin residue in foodstuffs of animal originfor import and export--LC-MS/MS method2008-11-18 发布2009-06-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局转效码防伪 SN/T 2223—2008前言本标准的附录 A 和附录 B均为资料性附录本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局、中华人民共和国江西出入境检验检疫局、大连工业大学。本标准主要起草人：孙兴权、林维宣、温志海、张玉苍。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。1 SN/T 2223--2008进出口动物源性食品中硫粘菌素残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法范围本标准规定了进出口动物组织中硫粘菌素残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法。本标准适用于猪肉、猪肝、猪肾中硫粘菌素残留量的检测和确证。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。GB/T 6682　分析实验室用水规格和试验方法。（GB/T 6682—2008,ISO 3696:1987,MOD)3方法提要试样经乙酸乙酯提取，正已烷脱脂，固相萃取小柱净化后，液相色谱-质谱/质谱法测定和确证，外标法定量。4试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的-级水4.1乙酸乙酯:色谱纯。4.2正己烷：色谱纯。4.3甲醇：色谱纯。4.4乙腈：色谱纯。4.5 乙酸铵。4.60.1%乙酸铵：称取1.0g乙酸铵，加水溶解并定容至1000mI4.7硫粘菌素标准物质（Tiamulin）C28H47NO S,CAs No.$5297-95-5,纯度大于等于98.8%4.8硫粘菌素标准储备溶液（1.0mg/m):称取适量的硫粘菌素标准物质（4.7），用甲醇配成1.0 mg/mL的标准储备液。储备液置于一18℃避光贮存。4.9硫粘菌素标准工作溶液（1.0 μg/mL）：吸取适量的硫粘菌素标准储备溶液（4.8），用甲醇配成1.0 μg/mL的标准工作溶液。标准工作溶液置于 4℃避光贮存。4.10固相萃取小柱：Waters oasis HLB柱,500 mg,6 mL,或相当者。4.11微孔滤膜:0.45 μm,有机相。5仪器和设备5.1液相色谱-串联四极杆质谱仪：配有电喷雾离子源。5.2分析天平：感量分别为0.1mg和0.01g。5.3绞肉机。5.4　涡旋混合器：2000r/min。 SN/T 2223—20085.5离心机:3 000 r/min。5.6旋转蒸发器。5.7固相萃取装置。5.8具塞离心管:聚四氟乙烯,15 mL 和 50 mL。6试样制备与保存从所取动物肌肉、肝脏、肾脏全部样品组织中取出有代表性样品约0.5kg，用绞肉机充分绞碎混匀均分成两份。制备好的试样置于样品瓶中，密封，并标明标记，于一18℃以下冷冻存放。试样制备与保存过程中应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。7 测定步骤7.1　提取称取5g试样（精确到0.01g)于50 mL离心管（5.8)中,加人25mL乙酸乙酯（4.1），2000 r/min涡旋混匀2min,3000r/min离心5min,收集提取液至浓缩瓶中。残渣再加人 20 mL乙酸乙酯，重复上述抽提操作。合并提取液,50℃以下旋转浓缩至近干。用 4 mL正已烷(4.2)和4mL水依次将残渣转移至15mL离心管（5.8)中，2000 r/min 涡旋混匀1min,3000r/min离心3min,弃去上层正已烷溶液，再加人4mL正已烷，重复上述脱脂操作，所得水层提取液待净化。7.2　净化分别用甲醇(4.3)和水各3mL对Oasis HLB固相萃取小柱（4.10)进行活化预处理，然后将测定步骤7.1所得水层提取液转移至小柱上，控制流出速度小于.2mL/min。用10 mL水分次洗涤离心管，洗涤液淋洗 Oasis HLB小柱后弃去。用 6 mL甲醇洗脱，收集全部洗脱液，加水定容至10 mL,混匀后过0.45 μm滤膜（4.11)，供液相色谱-串联质谱测定。7.3硫粘菌素基质校准标准溶液的配制称取七个基质空白样品（称样量为5g)于50 mL离心管(5.8)中,其中六个空白样品中分别加人适量硫粘菌素标准工作溶液（4.9），按照样品操作步骤7.1