NYT 1602-2008植物油中叔丁基羟基茴香醚（BHA）、2%2C6-二叔丁基对甲酚（BHT）和特丁基对苯二酚（TBHQ）的测定高效液相色谱法.pdf

ICS 67.200.10B 33NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1602—2008植物油中叔丁基羟基茴香醚（BHA）、2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)和特丁基对苯二酚(TBHQ)的测定高效液相色谱法Determination of butylated hydroxyanisole,butylated hydroxytolueneand tertiary butylhydroquinone content in vegetable oilHigh performance liquid chromatography2008-07-01实施2008-05-16 发布中华人民共和国农业部发布 NY/ T 1602-2008前言本标准的附录 A 为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部种植业管理司提出并归口。本标准起草单位：农业部油料及制品质量监督检验测试中心、中国农业科学院油料作物研究所。本标主要起草人：张文、李培武、丁小霞、谢立华、胡乐华、汪雪芳、姜俊。 NY/T 1602-—2008植物油中叔丁基羟基茴香醚（BHA）、2,6-二叔丁基对甲酚（BHT)和特丁基对苯二酚(TBHQ)的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了高效液相色谱法测定植物油中叔丁基羟基茴香醚（BHA)、2，6-二叔丁基对甲酚(BHT)和特丁基对苯二酚(TBHQ)含量的方法。本标准适用于植物油中叔丁基羟基茴香醚(BHA)、2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)和特丁基对苯二酚(TBHQ)含量的测定。本方法检出限:TBHQ为 1.0 mg/kg,BHA 为 1.0 mg/kg,BHT 为 0.5 mg/kg。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本适用于本标准。GB/T 15687油脂试样制备GB/T 6682分析实验室用水规格和实验方法（GB/T6682—1992，eqvISO3696—1987）3原理样品中叔丁基羟基茴香醚(BHA)、2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)和特丁基对苯二酚(TBHQ)经甲醇提取纯化，反相Ci8柱分离后，用紫外检测器280nm检测,外标法定量。4 试剂除非另有说明，均使用分析纯试剂和二级水。4.1 甲醇:色谱纯。4.2乙酸：色谱纯。4.31mg/mL混合标样储备液:取叔丁基羟基茴香醚(BHA)、2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)和特丁基对苯二酚(TBHQ)各100mg用甲醇溶解并定量至 100mL。4.4流动相:流动相 A为甲醇,流动相 B为1%乙酸水溶液。5仪器和设备5.1分析天平,，感量0.0001g。5.2 离心机,转速为 3000 r/min。5.3旋涡混合器。5.415 mL具塞离心管。5.50.45 μm有机相滤膜。5. 6 Nova - pak Ci:色谱柱(3. 9 mmX150 mm)。5.7高效液相色谱仪,带紫外检测器。1 NY/T 1602--20086分析步骤6.1 试样制备按GB/T15687制备样品。6.2试液的制备准确称取植物油样约 5g(精确至 0.001g),置于 15mL具塞离心管中,加入8mL甲醇（4.1),旋涡混合3min,放置 2min，以3000 r/min 离心5min,取出上清液于25 mL容量瓶中,残余物每次用8mL甲醇(4.1)提取2次,清液合并于25mL容量瓶中，用甲醇(4.1)定容，摇匀，经0.45μm有机相滤膜过滤，滤液待液相色谱分析。6.3色谱分析取1mg/mL混合标样储备液（4.3)，用甲醇(4.1)稀释至10μug/mL、50 μg/mL、100 μg/mL、150μg/mL、200μg/mL、250μg/mL标准使用液连同样品依次进样，进行液相色谱检测，建立工作曲线。色谱条件：流速0.8mL/min，进样量10μL，柱温为室温，检测器波长280nm。流动相A为甲醇，流动相B为1%乙酸水溶液,梯度见表1。表 1 洗脱梯度流动相 A,%流动相 B,%流量,mL/min时间,min600. 840010.801007. 500.810011.50.840 6013.00. 8604015. 07 分析结果的表述样品中叔丁基羟基茴香醚(BHA)、2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)或特丁基对苯二酚(TBHQ)含量测定结果数值以毫克每千克表示(mg/kg）,按公式(1)计算：X: = A: ×VXD× 1000(1)MV2式中:样品中叔丁基羟基茴香醚(BHA)、2,6-二叔丁基对甲酚（BHT)或特丁基对苯二酚X;*(TBHQ)含量的数值，单位为毫克每千克(mg/kg)；A;