WST 96-1996尿中三氯乙酸顶空气相色谱测定方法.pdf

6-1996WS/T 96前言本标准适用于检测职业接触人群尿中三氟乙酸的浓度。本标准是参考了国外的检验方法，结合我国情况经过实验室研究和现场验证后提出的。本标准与分光光度法的测定资格等效。本标准由卫生部卫生监督司提出。本标准起草单位：北京医科大学公共卫生学院本标准主要起草人：吕姝清、周玲、倪波。本标准由卫生部委托技术归口单位中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所负责解释。 中华人民共和国卫生行业标准尿中三氯乙酸WS/T 96-1996顶空气相色谱测定方法Urine--Determination of trichloroacetic acid---Headspace gas chromatographic method1 范围本标准规定了顶空气相色谱法测定尿中三氯乙酸浓度的方法。本标准适用于接触三氯乙烯的工人尿中三氯乙酸浓度的测定。2原理三氯乙酸加热脱羧生成三氯甲烷，在密闭的顶空瓶内，在一定温度下，三氯甲烷分子在气液两相之间的分配达到动态平衡，此时三氯甲烷在气相中的浓度和在液相中的浓度成正比，也即和液相中三氯乙酸的浓度成正比。气相中的三氯甲烷经聚乙二醇6000柱分离，氢焰离子化检测器检测，保留时间定性，以正丁醇作内标物，峰高比(或峰面积比)定量。3 仪器3.1聚乙烯塑料瓶，100mL。3.2恒温水浴箱，35～100℃，控温精度士1℃。3.3顶空瓶，25mL玻璃瓶，带配套硅橡胶帽。3.4微量注射器，5μL。3.5注射器，1mL。3. 6气相色谱仪，氢焰离子化检测器。4 试剂4.1正丁醇。4.2三氯甲烷。4.3聚乙二醇6000，色谱固定液。4.46201红色担体，40～60目。4.5三氯乙酸标准溶液：称量2g三氯乙酸，溶于100mL蒸馏水中，配制成约20mg/mL贮备液，以氢氧化钠标准溶液标定，得到准确浓度后放于4℃冰箱内保存；临用前配制成100μg/mL的标准溶液。5采样用聚乙烯塑料瓶收集接触者班后尿样，尿样不少于50mL。混匀后，尽快测量尿比重，迅速送至实验室。放入4℃冰箱中保存，10天之内分析测定。1997-09-01实施中华人民共和国卫生部1997-01-11批准 WS/T 96-19966分析步骤6.1仪器操作条件：色谱柱：柱长2m，内径4mm，不锈钢柱；柱填料：聚乙二醇6000：6201担体=10：100；柱温：120℃；检测器温度：150℃；载气：氮气，流量：40mL/min。6.2标准曲线绘制：取7支顶空玻璃瓶，按表1配制标准管。表1三氯乙酸标准管配制012?56号管00.200. 401. 002.004. 000.10标准溶液，mL1. 004.804. 604. 003. 00蒸馏水，mL5. 004.9080. 00. 02. 04.08. 020. 040.0三氮乙酸的浓度，g/mL于上述标准管中，用微量注射器各加入2uL的正丁醇，立即用硅橡胶帽封紧瓶口，混匀后，移入90℃恒温水浴上恒温90min，然后把小瓶转移到45℃恒温水浴上，平衡20min。将仪器按测定条件调节到最佳状态，用1mL加热的注射器从瓶塞处抽取瓶内上部空气各1mL，注入色谱柱。以三氟甲烷与正丁醇的峰高比(或峰面积比)减去0号管即空白管的峰高比（或峰面积比)为纵坐标，三氟乙酸的浓度(μg/mL）为横坐标，绘制标准曲线。6.3测定将样品从冰箱中取出，使恢复到室温，充分混合，取5mL进行测定，并取5mL蒸馏水做为试剂空白，其余步骤同标准曲线绘制。在标准曲线测定的同样条件下，测定样品和试剂空白的三氯甲烷与正丁醇的峰高比；以测得的样品的峰高比减去试剂空白的峰高比后，由标准曲线查得三氯乙酸的浓度(μg/mL)。7 计算7.1按式(1)计算尿样换算成标准比重(1.020)下的浓度校正系数。1.020-1.000.(1)d = 1. 000式中：k—浓度校正系数；d—尿样实测比重。7.2按式(2)计算尿中三氯乙酸的浓度。C=c·k.(2)式中：C-尿中三氯乙酸的浓度,mg/L;c——由标准曲线上查得的三氯乙酸的浓度，μg/mL;k——浓度校正系数。8说明8.1本法的最低检出浓度为0.2mg/L（取尿样5mL），线性范围0~80mL/L；相对标准偏差RSD=4.7%~9.6%加标回收率为78.0%~105%。8.2三氯乙酸热脱羧的温度需90℃，90min；若温度降至80℃，则需要120min，分析时间加长。8.3热脱羧生成的三氯甲烷易挥发，顶空瓶的气密性要良好，以防止挥发损失。 WS/T96-19968.4顶空瓶在取样之后，其中的气液平衡被破坏。因此，顶空分析一般取样一次，若有必要取第二次样，也要待新的平衡建立之后再取样。