SN_T 3641-2013出口水产品中4-己基间苯二酚残留量检测方法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3641—2013出口水产品中4-已基间苯二酚残留量检测方法Determination of 4-hexylresorcinol residues in aquaticproduct for export2013-08-30 发布2014-03-01实施中华人民共和国·发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 3641—2013前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容有可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国广东出人境检验检疫局。7本标准主要起草人：林海丹、邵琳智、席静、谢守新、邹志飞、林峰、王岚、陈毓芳。I SN/T 3641--2013出口水产品中4-已基间苯二酚残留量检测方法1 范围本标准规定了出口水产品中 4-己基间苯二酚残留量的液相色谱测定方法。本标准适用于虾、蟹中 4-己基间苯二酚残留量的测定。2方法提要试样采用乙酸乙酯提取，液液分配净化，采用液相色谱荧光检测器测定，外标法定量。3试剂和材料除另有说明外，所有试剂均为分析纯，水为去离子水。3.1乙腈：色谱纯。3.2甲醇：色谱纯。3.3正已烷。3.4乙酸乙酯。3.5乙腈饱和正已烷：在正已烷中加入-定量的乙腈至底部清晰可见乙腈层。3.6无水硫酸钠：经650℃灼烧4K,置于干燥器内备用。3.7甲醇-乙腈-水溶液(1+2+1,体积比）。3.84-己基间苯二酚标准物质（4-hexylresorcinol,CAS号：136-77-6)：纯度大于或等于 99%。3.94-己基间苯二酚标准储备溶液（100 mg/L)准确称取适量的4-已基间苯二酚标准物质，用甲醇配成浓度为 100 mg/L的标准储备溶液。该溶液在一18℃保存,有效期为半年。3.104-已基间苯二酚标准中间溶液（1.00mg/L)：准确移取 1.00mL的 4-已基间苯二酚标准储备溶液(3.9)于100 mL的容量瓶，用甲醇稀释至刻度配成浓度为 1.00 mg/L 的标准中间溶液。该溶液在一18℃保存,有效期为三个月。3.114-已基间苯二酚标准工作溶液：根据需要移取适量标准中间溶液（3.10），以甲醇-乙腈-水溶液（3.7)稀释成适合的标准工作溶液，现配现用。3.12微孔滤膜：有机相，0.20μm。4仪器和设备4.1液相色谱仪：配荧光检测器。4.2分析天平：感量为 0.1 mg和 0.01g。4.3组织捣碎机。4.4涡旋振荡器。4.5匀质器。4.6离心机:4 000 r/min。 SN/T 3641-20134.7旋转蒸发仪。4.8　超声波水浴。4.9聚丙烯具塞离心管:50mL;15mL。4.10浓缩瓶:100 mL。5试样的制备和保存从原始样品中取出代表性的样品500g，去除外壳后，用组织捣碎机捣碎混勾，均分成两份，分别装人洁净容器作为试样，密封并标识。将试样放于一18℃保存。制样和试样保存过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。6测定步骤6.1提取称取试样2g(精确到0.01g)于50mL离心管中，加人20mL乙酸乙酯和3g无水硫酸钠，匀质30 s，4000r/min离心3min，上清液过无水硫酸钠转移到浓缩瓶中，另取一支离心管，加入15mL乙酸乙酯洗涤勾质器刀头，洗涤液移人第一支离心管中，于涡旋振荡器振荡提取1 min，4 000 r/min离心3min,合并洗涤液于100 mL浓缩瓶中,38℃旋转蒸发浓缩至干。6.2　净化上述残渣（6.1)立即加人2.0mL甲醇-乙腈-水溶液（3.7)溶解，超声波水浴10s，涡旋振荡30s，加人2.0mL乙腈饱和正已烷（3.5），涡旋30s，转移到15mL离心管中，3500r/min离心3min，弃正已烷层，加人2.0mL乙腈饱和正已烷，重复操作一次，下层过0.20μm滤膜，供高效液相色谱测定。6.3液相色谱测定6.3.1色谱条件色谱条件如下：a）1色谱柱:C1g,250 mmX4.6 mm(内径),5 μm;b)流动相：乙腈-水溶液（75十25，体积比）；流速:1.0 mL/min;c)d）检测波长：激发波长276 nm;发射波长307nm;e）柱温:30 ℃；f)进样量:10 μL。6.3.2色谱测定根据样液中待测物的含量情况，选取响应值相近的标准工作溶液进行色谱分析，标准工作溶液和待测样液中的响应值均应在仪器线性范围内。对标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。在上述色谱条件下，4-已基间苯二酚的保留时间约为5.0min，标准物质色谱图分别参见附录A中图A.1。6.4空白试验除不加试样外，均按上述测定步骤进行。2 SN/T 3641—20137 结果计算和表述用数据处理软件或按式(1)计算试样