SN_T 3148-2012出口食品中过氧化苯甲酰含量的测定 高效液相色谱法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3148--2012出口食品中过氧化苯甲酰含量的测定高效液相色谱法Determination of benzoyl peroxide in food for export-HPLC2012-05-07 发布2012-11-16 实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局数码防体 SN/T 3148—2012前言本标准按照 GB/T 1.12009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国浙江出人境检验检疫局、中华人民共和国连云港出人境检验检疫局。本标准主要起草人：刘海山、陈笑梅、黄超群、石蕾、楼成杰、汤杭燕、王海涛。 SN/T 3148---2012出口食品中过氧化苯甲酰含量的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了食品中过氧化苯甲酰含量检测的高效液相色谱测定方法。本标准适用于小麦粉、米粉和马铃薯淀粉等食品中过氧化苯甲酰含量的检测。第一法　还原法2方法提要用甲醇-水（2十8,体积比)提取样品中的过氧化苯甲酰，在提取液中加人亚硫酸钠溶液，将过氧化苯甲酰还原为苯甲酸,过 0.45 μm滤膜后，用高效液相色谱仪测定,外标法定量。3试剂和材料除另有规定外，试剂均为分析纯，水为重蒸水或去离子水。3.1　乙腈:液相色谱级。3.2甲醇：液相色谱级。3.3亚硫酸钠。3.4乙酸铵。3.5甲醇-水(2十8,体积比):取 100 mL甲醇(3.2)，与 400 mL水混匀。3.64%亚硫酸钠溶液：称取8.0 g亚硫酸钠(3.3）,用水溶解并定容至200 mL。3.70.005 mol/L乙酸铵溶液：称取0.39 g乙酸铵（3.4)，用水溶解并定容至1 000 mL。3.8过氧化苯甲酰（分子式：C14H1.O4,CAS号：94-36-0)标准品：纯度大于等于98.0%。3.9过氧化苯甲酰标准储备溶液：准确称取适量过氧化苯甲酰标准品（3.8)，用乙腈配制成200μg/mL标准储备液,0℃～4℃储存。3.10过氧化苯甲酰标准工作溶液：根据需要，用乙腈将标准储备液（3.9)稀释成适当浓度的标准工作溶液。3.110.45 μm有机系滤膜。4仪器和设备4.1高效液相色谱仪，配有紫外检测器或二极管阵列检测器。4.2分析天平：感量0.1 mg和0.01 g。4.3涡旋混匀器。4.4离心机：转速不低于4 000 r/min。 SN/T 3148—20125试样制备与保存5.1试样制备取代表性样品约500g，混匀后均分成两份，装人洁净容器内，作为试样，密封，并标明标记。5.2试样保存将试样置于0℃～4℃保存。在制样操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。6测定步骤6.1　提取称取1g试样(精确至0.01g）,置于50mL离心管中。加入10~mL甲醇-水（3.5），涡旋混匀5min后离心(4 000 r/min)5 min,过滤。6.2　还原取 5.0 mL滤液,转移至另一皮离心管中。加大50-ml-4%亚硫酸钠溶液（3.6），涡旋混匀 5 min后静置10min。过0.45μm滤膜k3.11)后供高效液相色谱分析。6.3标准工作曲线在5个离心管中分别加入适量过氧化苯甲酰标准工作溶液用甲醇-水（3.5)补至5.0mL，再加人5.0mL4%亚硫酸钠溶液(3.6)，使混匀后溶液中过氧化苯甲酰的浓度分别为0.25μg/mL、0.5 μg/mL、漓旋混匀5mit后静置10 min。0.45μm滤膜后供高效液相色谱1 μg/mL.5 μg/mL.10 μg/mL.分析。6.4　测定6.4.1色谱条件色谱条件如下：色谱柱:Ci8,5 μm,250 mmX4.6°mm(内径),或相当的色谱柱;a）b）流动相：梯度洗脱条件见表1c）流速:1.0 mL/min;d）检测波长：230 nm;e)进样量:50 μL。表1#梯度洗脱条件甲醇/%0.005 mol/L乙酸铵/%时间/min10 900.001090400109011.002 SN/T 3148---20126.4.2色谱测定根据样液中苯甲酸含量，选择浓度相近的标准工作溶液。还原所得标准溶液和样液中苯甲酸的响应值均应在仪器检测的线性范围内。对还原所得标准溶液和样液等体积穿插进样测定。在上述色谱条件下,苯甲酸的保留时间为7.1 min。还原所得苯甲酸标准溶液的色谱图参见图 A.1，苯甲酸的紫外光谱图参见图 A.2。6.5 空白试验除不加试样外，均按上述步骤进行。7结果计算和表述用色谱数据处理机或按式(1)计算试样中过氧化苯甲酰含量，计算结果应扣除空白值。Xexy(1)m式中:X-试样中过氧化苯甲酰的含量，单位