SN 1319-2003国境口岸病毒性肝炎检验规程.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1319—2003国境口岸病毒性肝炎检验规程Examination codes for viral hepatitis at frontier port2003-08-18 发布2004-02-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 1319—2003前言本标准的附录 B、附录 C为规范性附录,附录 A为资料性附录,本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国天津出人境检验检疫局负责起草，中华人民共和国北京出人境检验检疫局参加起草。本标准主要起草人：何晨光、柴宏森、望哲、侯明、李智慧、周沫、常春雨。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 SN/T 1319—2003国境口岸病毒性肝炎检验规程1 范围本标准规定了国境口岸病毒性肝炎(甲型、乙型、丙型、丁型和戊型病毒性肝炎)的检验规程及报告方法。本标准适合于国境口岸内病毒性肝炎的检验。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本适用于本标准。GB 15990—1995乙型病毒性肝炎诊断标准及处理原则GB15999--1995丁型病毒性肝炎诊断标准及处理原则GB17010—1997甲型病毒性肝炎诊断标准及处理原则3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3. 1 viral hepatitis病毒性肝炎由肝炎病毒(主要包括甲型、乙型、丙型、丁型和戊型肝炎病毒)引起的传染病。4 检验对象口岸内病毒性肝炎的检验对象包括：人出境体检人员；国境口岸公共场所、饮食行业从业人员；申请检验人员。5检验程序5.1 准备5.1.1 标本的核查标准的核查工作重点为以下几个方面：核实化验单与标本的相符性；一检查并记录有无溶血和黄痘等情况；检查样品容器有无破损和遗漏情况。5.1.2制样将血清放 1h后，3000 r/min离心15 min，吸取血清进行检验。5.1.3血清保存离心后的血清如在三天内检验，可在2℃～8℃冰箱保存；短期内可在一20℃以下保存,长期可在一70℃以下保存。 SN/T 1319-20035.1.4检验器材和试剂常用检验器材和试剂的准备参见附录A。5.2实验室检测5.2.1甲型病毒性肝炎的检测按照GB17010一1997中附录A的规定执行。5.2.2乙型病毒性肝炎的检测按照GB15990--1995中附录A的规定执行。5. 2. 3丙型病毒性肝炎的检测见附录 B。5. 2.4丁型病毒性肝炎的检测按照GB15999一1995中附录A的规定执行。5.2.5戊型病毒性肝炎的检测见附录 C。6检验报告6.1检测阴性结果应填记“阴性”,并注明方法。6.2检测发现阳性标本应进行复检，复检阳性可报告阳性结果并填记“阳性”,复检阴性应建议过一段时间后复查。 SN/T 1319—2003附录A(资料性附录)病毒性肝炎检验常用器材和试剂A.1 器材病毒性肝炎检验常备仪器包括-10μL、50μL、100μL定量加样器及吸头；-37℃恒温培养箱；震荡器;一离心机；普通冰箱；低温冰箱；-酶标仪；洗板机。A. 22 试剂使用的试剂盒应有国家有关部门批准的生产号，同时该试剂盒必须通过批批检合格后方可使用。3 SN/T 1319---2003附录B（规范性附录）丙型病毒性肝炎的检测B.1 丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)的检测B.1.1 原理采用间接ELISA法原理。所用包被抗原为合成多肽抗原和基因工程抗原（包括 HCV病毒结构区核心抗原和非结构区抗原）。待测样本加入已包被抗原的反应孔内孵育，若标本中含有抗-HCV抗体，则该抗体与孔内抗原形成抗原抗体复合物。加人酶结合物，经孵育后酶结合物连接至抗原抗体复合物上，在TMB底物参与反应的情况下产生颜色B. 1.2 试剂盒试剂盒应有以下部分组成：微孔反应板；一样品稀释液;一阳性对照;阴性对照；一酶结合物；—洗涤液；显色液 A;显色液B;终止液。B.1.3操作步骤检验的操作严格按照以下步骤进行：a）将 100 μL样品稀释液加人各反应孔中（预留空白对照一孔、阳性对照三孔、阴性对照二孔）;b）将10 L待检样品加入加有样品稀释液的反应孔中混匀；在预留孔中分别加人阳性对照三孔、阴性对照二孔和空白对照一孔，加样量为100 μL，三种对c照不需稀释,空白对照为样本稀释液；d)混匀，封板，置37℃孵育30min;e）洗板：1）手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5s，甩干，重复五次后拍干；2）洗衣机洗板：选择洗涤五次程序洗板后拍干；每孔加人酶结合物100μL，混匀，封板，置