鱼类高效疫苗的研制与应用.docxVIP

鱼类高效疫苗的研制与应用 水产养殖的发展与疾病的预防和控制密切相关。在长期的鱼病防治过程中,人们逐步意识到药物治疗的不足之处。鱼患病后往往因厌食而难以摄食适宜的药物量;滞留在鱼体内的药物残毒对人体健康造成影响;较长时间使用药物,病原会产生抗药性;大量药物的花费使养殖成本大大提高;有些疾病尚无有效的药物。以上诸多原因促使鱼病专家对鱼类疫苗发生兴趣,投入大量时间进行研究,并取得了一定的成绩。本文对鱼类疫苗的相关研究进行了概述,以供参考。 1 预防鱼类疾病的商品性疫苗 1942年,Duff首次应用灭活的杀鲑产气单胞菌(Aeromonas salmonicida)口服免疫硬头鳟获得成功。虽然该实验未能被后人重复证实,但毕竟开创了疫苗在鱼类应用上的新纪元。此后许多人探索性地研究、制备疫苗,对那些爆发性和难以用药物防治的鱼病进行免疫预防。其中弧菌病菌苗、肠道性红嘴病(ERM)菌苗等获得了成功,但有些处于窘境中(如:病毒性出血败血症减毒疫苗出现返强现象),有些很难大量生产(如:小瓜虫病疫苗),有些因效果不稳定而影响应用前景(如:疥疮病疫苗)。这些探索使人们认识到应用疫苗预防鱼类疾病的可能。 1975年,美国疫苗有限公司(AVL)开始生产商品性鱼用疫苗。第一种获准生产的是ERM菌苗。不久以后,英、法、加拿大、丹麦、日本以及我国的台湾也出现了类似的公司。生产上应用的商品疫苗有:ERM菌苗、香鱼、鳗鲡及虹鳟的弧菌病菌苗等。1984年2月,首次鱼用疫苗接种研讨会在法国巴黎举行。24个国家和地区的78名代表以及联合国粮农组织和国际动物流行病办公室的官员参加了会议,研讨了鱼用疫苗的应用与研究状况。这次会议是鱼用疫苗发展史上的一个重要里程碑。新技术、新方法逐渐被用于病毒病疫苗、高效价菌苗的研制。Gutierrez M A等用含有抗爱德华氏菌抗体的卵黄免疫蛋白Y(LgY)来防御日本鳗(Anguilla japonical)的Parcolo 疾病,可有效地防御爱德华氏菌的伤害。Chou H Y等将抗病毒核蛋白的单克隆抗体应用于感染性造血器官坏死的病原学的研究。 2 疫苗类型 根据获得疫苗的不同方法,可将其分为:死疫苗、减毒疫苗、化学疫苗、亚单位疫苗、基因工程疫苗、合成肽疫苗等。 2.1 性不受影响的情况下灭活效果 又称灭活苗或灭能苗。将病原体扩大培养后,采用物理或化学方法在确保免疫原性不受影响的情况下灭活。死苗安全性好,制造容易,但是由于部分抗原成分被破坏,故存在免疫效果不理想、免疫力持久性差等问题。从1973年起,中国科学院水生生物所等开始研制草鱼出血病细胞培养灭活疫苗,已取得明显效益。 2.2 培养了抗菌力 用活的变异弱毒制成。接种后,它在鱼体内生长繁殖犹如发生了一次轻微的感染,所以获得的免疫力持久而坚强。但有的活苗在毒力上有返祖的危险,有的活疫苗残毒力太强,可能引起强烈的接种损失。该类疫苗有传染性造血组织坏死病毒(IHNV)减毒疫苗、疥疮病减毒菌苗、草鱼出血病细胞培养弱毒疫苗等。 2.3 有效衍生物的疫苗 用化学方法(如:乙醇沉淀、硫酸铵盐析)从微生物体中提取有效抗原成分制备的一类疫苗。该疫苗具有接种量小、免疫原性强、反应小等优点,但制造技术复杂。这类疫苗有类结节症、鲤鱼气单胞菌以及草鱼烂鳃病LPS疫苗。 2.4 dna疫苗 又称核酸疫苗或基因疫苗。DNA疫苗是指含有编码抗原基因的真核表达质粒DNA,经直接接种体内后,可被宿主细胞摄取,并转录、翻译、表达出相应的抗原,然后通过不同途径刺激机体产生针对此种抗原的免疫应答。 自Wolff J A等在1990年首次提出核酸疫苗的设想后,核酸疫苗有了出人意料的迅速发展。许多鱼病专家已经采用重组DNA技术进行疫苗的研究。在利用基因工程制苗的诸多方法中,DNA疫苗被认为是有发展潜力的新型疫苗。目前鱼用DNA疫苗主要是针对病毒性鱼病,研究较多的是出血性败血症病毒(VHSV)和传染性造血器坏死病病毒(IHNV)疫苗。Lorenzen N针对VHSV病毒G蛋白构建的DNA疫苗能够诱导70%的虹鳟产生较高水平的免疫保护性。Gomez Chiarri M等报道:以鲤鱼的β-肌动蛋白启动子构建的DNA疫苗能够在鱼体内表达荧光素酶基因。 与常规基因重组疫苗相比DNA疫苗有以下优点:易于构建、易于制备和稳定性高;具有高效性;可组成多价疫苗,即一种基因疫苗能诱导产生针对多个抗原表位的免疫保护作用。另外,由于质粒本身具有佐剂的功效,所以使用DNA疫苗免疫接种时不用加佐剂。但是DNA疫苗也存在缺陷。目前为止DNA疫苗的接种多采用肌肉注射。这种方法耗时费力,而且不适用于鱼苗和经济价值较低的鱼类,在实际生产中具有一定的局限性,因此探索新的免疫接种方法是DNA疫苗研究需要解决的问题。此外优化DNA疫苗效率,降低疫苗的生产成本等也是影响其应用