SN_T 3392-2012国境口岸莱姆病螺旋体检验规程.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3392—2012国境口岸莱姆病螺旋体检验规程Codes of examination of Borrelia burgdorferi at frontier port2012-12-12 发布2013-07-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局0涂是查真璃 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准国境口岸莱姆病螺旋体检验规程SN/T 3392-2012*中国标准出版社出版北京市朝阳区和平里西街甲2号（100013)北京市西城区三里河北街16号（100045)总编：（010址 www. spc. net. cn中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*印张 0.75字数 18 千字开本880×1230 1/16反　2014年2月第一次印刷2014年2月第一版印数 1-1 600*书号：155066·2-25389 SN/T 3392-2012前言本标准是按照GB/T1.1--2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国黑龙江出人境检验检疫局、军事医学科学院微生物流行病研究所。本标准主要起草人：鞠文东、孙毅、付维明、杨德文、徐宁、程成、王艳梅、丁淑丽、包力。I SN/T 3392—2012国境口岸莱姆病螺旋体检验规程范围1本标准规定了国境口岸莱姆病螺旋体的检验对象、方法、生物安全要求及结果判定。本标准适用于国境口岸莱姆病螺旋体的检验。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB19489　实验室‧生物安全通用要求SN/T1312国境口岸森林脑炎监测规程SN/T1638—2005　国境口岸莱姆病蓝测规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3. 1莱姆病螺旋体Borrelia burgdorferi细胞外寄生、微嗜氧型的螺旋体经蜱传播，是I起人体莱姆病（Ly)yme disease)的病原体，引起的临床症状多样，除慢性游走性红斑和关节炎外,还常伴有心脏损害和神经系统受累等症状。4实验室生物安全防护检测样本的采集和处理应符合无菌操作原则，进行样本检测的实验室应符合GB19489中生物安全二级实验室要求。5 对象5.1疑似感染莱姆病的人出境人员、口岸边境人群的血液样本和其他组织样本。5.2蜱及宿主动物标本。6试剂及器材6.1莱姆病螺旋体培养及聚合酶链反应(PCR)检验试剂和器材参见附录 A，或购买符合要求的商品化检测试剂盒。6.2血清学检验试剂和器材见SN/T1638-2005中附录A，或购买符合要求的商品化试剂盒。7标本的采集和处理按照附录B的方法进行。 SN/T 3392—20128实验室检验方法8.1 形态学检验将染色的玻片置于低倍显微镜载物台上，对准焦距。在涂片上红细胞分散均匀的部分，400倍暗视野或油镜下耐心仔细按顺序观察，红细胞被染成红褐色，莱姆病螺旋体被染成蓝色，间距约8～10个螺距，螺距较大。8.2血清学检验按照SN/T1638一2005中附录A规定的方法进行，或按照商品化试剂说明书操作。8.3聚合酶链反应(PCR)检验参照附录C规定的方法进行。8.4离体培养鉴定按附录D规定的方法进行。9结果判定9.1形态学检验9.1.1标本中观察到典型的莱姆病螺旋体，报告“观察到莱姆病螺旋体”。9.1.2标本中300个以上视野，未观察到典型的莱姆病螺旋体，报告“未检出莱姆病螺旋体”。9.2血清学检验9.2.1血清学检验阳性，报告柴姆病螺旋体抗体阳性”。9.2.2血清学检验阴性，报告“莱姆病螺旋体抗体阴性”。9.3聚合酶链反应(PCR)检验9.3.1PCR检验阳性，报告“莱姆病螺旋体核酸检验阳性”。9.3.2PCR检验阴性，报告“莱姆病螺旋体核酸检验阴性”。9.4离体培养鉴定9.4.1标本中培养出莱姆病螺旋体，报告“离体培养检出莱姆病螺旋体”9.4.2盲传三代未见可疑莱姆病螺旋体，报告“离体细胞培养三代，未检出莱姆病螺旋体”。10「阳性结果的处置10.1形态学检验和血清学检验阳性的标本，应选择离体分离培养方法进行复检验证。10.2离体培养阳性结果应出具阳性报告单，升向上级主管部门报告。2 SN/T 3392--2012附录A（资料性附录）莱姆病螺旋体检验主要试剂及器材A.1主要试剂A.1.1 姬姆萨(Gimsa)染液姬姆萨染料0.8g甘油50 ml甲醇50 mL将0.8g染料加到50mL甘油中,混匀，置 60℃2h,不时搅拌。取出凉至与室温相同时加人甲醇50mL，用磁力搅拌过夜。用滤纸过滤，滤液即为