SN_T 3223-2012动物传染病PCR检测技术确认规范.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3223-2012动物传染病PCR检测技术确认规范Protocol for validation of PCR for thediagnosis of animal infectious/contagious diseases2013-05-01实施2012-10-23 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 3223—2012前言本标准按照GB/T1.1-2009 给出的规则起草。本标准修改采用了世界动物卫生组织（OIE)《陆生动物诊断试验和疫苗手册》2010版中第1.1.4/5章“传染性疾病诊断方法确认原则和方法”的相关规定。本标准与OIE《陆生动物诊断试验和疫苗手册》2010版第1.1.4/5章“传染性疾病诊断方法确认原则和方法”相比，主要技术差异在于：a）本标准只规定了如何对于非标准方法、实验室设计（制定)的方法、超出其预定范围使用的标准方法、扩充和修改过的标准方法进行确认，以证实该方法适用于预期的用途，不涉及方法建立过程和有效性监控；b）由于出人境动物检疫工作难以对目标动物群体中某种疾病的流行状况进行估计，对于方法的诊断敏感性和诊断特异性的评估难以进行，本标准只限于对方法分析特异性和分析敏感性的评价，不涉及诊断敏感性和诊断特异性。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国北京出人境检验检疫局、中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局、中华人民共和国江苏出入境检验检疫局、北京市兽药监察所、中国合格评定认可委员会。本标主要起草人：马贵平、史喜菊、李冰玲、郭志红、孙颖杰、姜焱、陶雨凤、李炎鑫 SN/T 3223—2012引言可靠的检测方法要求与检测领域内的所有国际和国家的法规要求相一致。兽医诊断实验室的认可活动只有在实验室的所有方法都得到充分确认的前提下才有意义。经过认可的实验室应该可以给出具有高度再现性的检测结果，但是如果方法确认的过程不恰当，试验结果同样可以对动物的感染状态做出错误判断。OIE标准阐明，为使一个试验方法被适当应用，方法应被充分确认，这种确认应遵循OIE《陆生动物诊断试验和疫苗手册》中有关“动物传染病诊断试验确认原则和方法”章节中方法确认的相关规定进行。方法确认是实验室质量体系的一个组成部分，其过程应该按照实验室质量管理体系的要求进行。确认是为了证明方法适用于预期目的。如果方法的预期国的是用于快速筛选受感染动物，方法就需要有很高的敏感性，以达到尽可能地检测出受感染动物；如果方法的预期目的是用于确诊试验，方法就需要有高的特异性。如果这两个目标都不能达到，那么就需要对试剂进行校准或替代，或者放弃这种方法。 SN/T物传染病PCR检测技术确认规范1范围本标准规定了动物传染病PCR检测技术确认要求及分析敏感性、分析特异性、重复性、再现性等方法性能评价的各要素。本标准适用于对动物传染病PCR检测技术的确认,也适用于动物产品中传染病病原PCR检测技术的确认。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T27025检测和校准实验室能力的通用要求（ISO/IFC_17025:2005,IDT)3术语和定义GB/T 27025中界定的以及下列术语和定义适用3. 1方法确认validation对一个试验程序(或诊断试验)进行评估，确定该程序或试验与预期目的适合性程度，是试验性能特征的证明。3. 2被分析物analyte通过分析方法证明或测定的成分，可以是病原或其组分3.3分析敏感性± analytical sensitivity;ASe样品中被分析物能够被检测出的最小量，即最低检测限。3.4分析特异性Eanalytical specificity; ASp方法能够区别的被分析物与其他成分之间交叉反应的程度。3.5重复性repeatability用同一方法对同一被分析物在相同条件下（设备、操作者、实验室和时间间隔)进行检测所得出的连续和独立的结果之间的一致性。3. 6再现性reproducibility由不同实验室的操作者用同一方法使用不同设备对同一被分析物进行检测所得出的单次测试结果之间的一致性。1 SN/T 3223-20123.7变异系数 CV各个重复的标准偏差与各个重复的平均值之比。3.8重复性极限r小于或等于在重复性条件下得出的两个测试结果之间的绝对差别的值。3.9再现性极限R小于或等于在再现性条件下得出的两个测试结果之间的绝对差别的值。3. 10准确性accuracy方法检测值与样品真实值之间的符合程度，表示为真阳/阴性率。4　PCR方法确认要素4.1参考样品4.1.