SN_T 5135-2019布氏蜗牛检疫鉴定方法.pdf

ICS 65.020.01B 16SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 5135-2019布氏蜗牛检疫鉴定方法Detection and identification of Fruticicola fruticum (Muller, 1774)2019-09-03发布2020-03-01实施海中国海确出队中华人民共和国海关总署发布HG944440018501高地刮开综层微活密码 SN/T5135—2019前言本标准按照GB/T1.1-~-2009给出的规则起草请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国福州海关、福建省农业科学研究院生物资源研究所、中华人民共和国拉萨海关。本标准主要起草人：周卫川、林阳武、王沛、吴宇芬、文艺、陈晟。1 SN/T 5135—2019布氏蜗牛检疫鉴定方法范围1本标准规定了布氏蜗牛的检疫鉴定方法。本标准适用于布氏蜗牛的检疫鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。SN/T3067—2011软体动物常规检疫规范3术语和定义SN/T3067一2011界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3. 1螺旋部spiral为动物内脏器官盘存之处，通常由除体螺层外的其他几个螺层组成。3. 2胚螺层embryonic shell贝壳最早发育的部分称为胚螺层，一般为壳顶1.5个～2个螺层，其形态有尖、钝、圆钝、扁平、乳头状，有的种类常被腐蚀磨损，但这些特征较为明显且稳定，常用于分类。3. 3外套膜mantle为陆生软体动物躯体背部皮质层皱褶延伸而成，是一层覆盖内脏囊的膜状物，肺血管网密布其上，可行呼吸作用与分泌碳酸钙形成贝壳。3.4矢囊dart sack蜗牛雌性生殖系统中一个藏有1枚或多枚中空的钙质或壳质骨针的肌肉质的囊。一般用长径与短径之比来描述矢囊的相对长度。3. 5阴茎鞘penis sheath包被在阴茎与阴茎本体外围的一层鞘状膜。3. 6轴唇columella lip贝壳壳口的边缘为口唇，按其在壳口中的位置不同可分为内唇、外唇、轴唇、基唇、上唇和下唇，靠近螺轴的口唇即称轴唇，有些种类的轴唇常外折导致脐孔部分或完全被覆盖。 SN/T 513520194基本信息学名：Fruticicola fruticum（Muller，1774)。异名：Helirfruticum，Muller，1774；Bradybaenafruticum（Muller，1774)。英文名:Bush snail。中文名：布氏蜗牛。分类地位：软体动物门（Mollusca），腹足纲（Gastropoda），肺螺亚纲（Pulmonata），柄眼目（Stylommatopgora)，巴蜗牛科（BradybaenidaePilsbry，1934），布氏蜗牛属（FruticicolaHeld，1838）。布氏蜗牛属只有2个种，即布氏蜗牛和史氏蜗牛Fruticicolaschrenkii（Middendorff，1851）。布氏蜗牛的其他信息参见附录A。5方法原理生态习性和传播方式及途径是确定现场检疫方式的依据。贝壳形态和软体解剖是实验室鉴定的主要依据，分子特征作为不具备形态学鉴定样品的鉴定依据。6器具和试剂6.1仪器和用具6.1.1仪器：体视显微镜、微型离心机、恒温金属浴、PCR仪、凝胶照相系统。6.1.2用具：放大镜、手电筒、塑料自封袋、广口标本瓶、4mm孔径土壤筛、小铁铲、游标卡尺、塘瓷盘、培养皿、镊子、剪刀、小剪刀、显微镊子、显微剪刀、微针（直径0.15mm）、解剖蜡盘、标签、1.5mL离心管、0.2mLPCR反应管、移液枪。6.2试剂除另有规定外，所有试剂均为分析纯。乙醇、硫酸镁、动物基因组DNA提取试剂盒、PCRMasterMix、ddH2O。7现场检疫对来自疫区（参见附录A)的运输工具和货物实施重点查验。仔细检查运输工具、废塑料、木质包装箱、苗木、水果、蔬菜、花卉、未经加工的植物性材料等是否有蜗牛附着其上，尤其要注意阴暗蔽光处的检查，用手电筒仔细寻找蜗牛的行迹。布氏蜗牛爬行过后，般都会留下银灰色的丝带状黏液痕迹，这是判定是否有蜗牛污染的重要依据。发现蜗牛，随时装人塑料自封袋或标本瓶带回实验室做进一步的检验鉴定。发现盆景等携带土壤或其他细碎衬垫材料时，需过筛检查是否有卵或幼螺。8实验室鉴定8.1测量、观察、解剖和饲养用游标卡尺测量贝壳的壳高和壳宽、卵粒的直径或长和宽。用肉眼或放大镜或体视显微镜仔细观察卵、贝壳和螺体的形态特征。2 SN/T 5135-—2019将闷杀处理（见10.1)后的标本，按照S