NY_T 2060.3-2011辣椒抗病性鉴定技术规程 第3部分：辣椒抗烟草花叶病毒病鉴定技术规程.pdf

ICS 65.020B 15NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 2060.3—2011辣椒抗病性鉴定技术规程第3部分：辣椒抗烟草花叶病毒病鉴定技术规程Rules for evaluation of pepper for resistance to diseases-Part 3: Rule for evaluation of pepper for resistance to tobacco mosaic virus2011-09-01 发布2011-12-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T 2060.3—2011前言NY/T2060《辣椒抗病性鉴定技术规程》分为5个部分：第1部分：辣椒抗疫病鉴定技术规程；-第2部分：辣椒抗青枯病鉴定技术规程；第3部分：辣椒抗烟草花叶病毒病鉴定技术规程；-第4部分：辣椒抗黄瓜花叶病毒病鉴定技术规程；第5部分：辣椒抗南方根结线虫病鉴定技术规程。本部分为NY/T2060的第3部分。本部分按照GB/T1.1--2009给出的规则起草。本部分由中华人民共和国农业部种植业管理司提出。本部分由全国蔬菜标准化技术委员会（SAC/TC467)归口。本部分起草单位：中国农业科学院蔬菜花卉研究所。本部分主要起草人：杨宇红、谢丙炎、冯兰香、杨翠荣、龚慧芝、苑振川、陈国华。 NY/T2060.3—2011辣椒抗病性鉴定技术规程第3部分：辣椒抗烟草花叶病毒病鉴定技术规程1范围本部分规定了辣椒抗烟草花叶病毒病鉴定的术语和定义、接种体制备、室内抗性鉴定、病情调查、抗病性评价以及鉴定记载表格。本部分适用于各种辣椒(CapsicumannuumL.）资源对疫病抗性的室内鉴定及评价。2术语和定义NY/T1857.7—2010界定的以及下列术语和定义适用于本文件2.1辣椒TMV病毒病tobaccomosaicvirusonpeppers由烟草花叶病毒（Tobaccomosaicvirus，TMV)引起的病株呈系统花叶，病叶偏小、稍皱缩；病株的茎部、枝条、叶柄、果柄甚至叶脉上出现长、短不一的褐色坏死条斑，大量落叶，严重时只剩少数叶片，尤以甜椒为最。病果表面有黄化斑或坏死斑,果肉变薄，提早脱落等症状的辣椒病毒病。3烟草花叶病毒接种体制备3.1病原物分离以常规汁液摩擦法，从受烟草花叶病毒危害的辣椒植株的典型病叶上分离病原物。分离物经血清学、寄主范围、枯斑寄主、理化性状及传播方式测定，电子显微镜观察病毒粒子形态等方法鉴定，确认为烟草花叶病毒(Tobaccomosaicvirus)后，再进行分离物纯化和致病性测定，保存备用。3.2株系鉴定用于抗病性鉴定接种的病毒分离物首先进行株系鉴定，鉴定方法参见A.2。3.3接种体繁殖和保存3.3.1接种体繁殖取少量烟草花叶病毒供试株系侵染的新鲜病叶摩擦接种在“普通烟（NicotianatabacumL.）”的健康叶片上，置防虫温室内（25℃~28℃)培养约2周，采收病叶。3.3.2接种体保存一种方法是将辣椒上烟草花叶病毒的不同株系接种在不同的辣椒品种上，即TMV-P0株系、TMV-P1株系、TMV-P1.2株系和TMV-P1.2.3株系分别接种在茄门甜椒（Capsicamannuumcv.qiemen)”Capsicurn annuumcv.Verbeterde Glas,C.frutescenscv.Tabasco和C.chinensePI159236”辣椒植株上，置防虫温室内长期保存，缺点是病毒容易被污染；另一种方法是将烟草花叶病毒不同株系的新鲜病叶制作成冻干叶，在一20℃以下可保存2年～3年。冻干叶的简易制作法：将鲜病叶剪成小块，在吸水纸上均匀地铺放一层，可照此连续铺放数层，但各层吸水纸之间必须用硅胶或氯化钙隔开，然后置于密封的容器里，再将容器置于4℃冰箱。头两天每天更换一次干燥剂，以后每两天更换一次，直到碎病叶彻底干燥，整个制作过程应防止其他病毒的污染。4室内抗性鉴定4.1鉴定室 NY/T 2060.3-2011苗期抗病性鉴定的鉴定室通常是可调节温度和光照的防虫日光温室，使之具备良好的发病环境。4.2鉴定设计鉴定材料随机排列或顺序排列，每份鉴定材料重复3次，每一重复10株苗。4.3鉴定对照材料设茄门甜椒为感病对照品种；抗病对照品种依接种的TMV株系而定：如接种TMV-PO株系用Capsicurn annuum cv.Verbeterde Glas辣椒，TMV-P1株系用“C.frutescens cv.Tabasco”辣椒，TMV-P1.2株系用Capsicurn chinense PI159236辣椒。4.4鉴定材料育苗鉴定种子在10%磷酸三钠溶液中浸泡15min，清水冲洗后置于恒温培养箱中28℃催芽，播种于育苗钵内。育苗基质为草炭、蛭石和菜田土（2：1：1），经高温蒸汽灭菌（134