SNT 1960-2007进出口动物源性食品中磺胺类药物残留量的检测方法 酶联免疫吸附法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1960—2007进出口动物源性食品中磺胺类药物残留量的检测方法酶联免疫吸附法Screening method of sulfonamide residues in animal originalfood for import and export-Enzyme linked immunosorbent assay method2008-03-01实施2007-08-06 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局数码防伪 SN/T 1960—-2007前言本标准附录 A、附录 B、附录 C 和附录 D均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局、天津科技大学、中华人民共和国湖北出人境局检验检疫局。本标准主要起草人：郑文杰、王硕、张宏伟、胡小钟、吴延晖、姚霞、张鸿雁、张燕、张骏。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 SN/T 1960—2007进出口动物源性食品中磺胺类药物残留量的检测方法酶联免疫吸附法范围1本标准规定了动物源性食品中七种磺胺类药物残留量的酶联免疫吸附测定方法。本标推适用于猪肉、鸡肉、猪肝、鸡蛋、鱼、牛奶中七种磺胺类药物残留量的筛选检测。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的用葡城为本标准的条款。凡是注旧期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容)或修订叛构不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡不注明且期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3测定方法3.1方法提要用提取液提取样品中磺胺类药物用竞争性酶联免疫吸附法进行检测。3.2试剂和材料除另有要求外，所有试剂均为分析纯，水为 GB/T.6682规定的一级水3.2.1磺胺类药物酶联免疫吸附测定试剂盒1（参见附录A3.2.2 丙酮。3.2.3 乙醇。3.2.4磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H/0)磷酸二氢钠(NaH,PO4·2H 0)3.2.5石3.2.6氯化钠。掩蔽剂稀释液：0.5%牛血清自蛋白1%牛血清白蛋白，于使用时配制。3.2.7 #3.2.8标准品：磺胺二甲异唑、磺胺噻唑、磺胺对甲氧嘧啶、磺腰甲氧嗪/磺胺吡啶、磺胺甲二唑、磺胺氯达嗪（英文名称分别为：sulfisozoleufathiazole、sufaheter sulfamethoxypyridazine, sulfapyridine,12-14-0/651-06-9、80-35-3、144-83-2、AS代码：12769-5、sulfamethizole, sulfachlorpyridazine;144-82-1、80-32-0）：纯度大于等于99%。3.2.9标准品贮备液：配制成10mg/L甲醇贮备液，一20℃保存，有效期3个月。低温保存试剂，放置于室温不要超过4h，使用时，各溶液应达到室温。3.3仪器和设备3.3.1 粉碎机。3.3.2均质器。3.3.3天平（精确到0.001g）。3.3.4旋涡混合器。1）磺胺类药物酶联免疫吸附测定试剂盒是由天津生物芯片技术有限责任公司提供的产品的商品名称。给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。1 SN/T 1960--20073.3.5离心机(转速 4 000 r/min)。3.3.6旋转蒸发仪。3.3.7酶标仪（测定波长 450 nm）。3.3.8洗板机。3.3.9单道微量加样器:20 μL,100 μL,200 μL。3.3.10多通道微量加样器：200μL。3.4试样制备取样品约500g，将其切碎后，经捣碎，混匀，均分成两份，装人洁净容器内，作为试样，密封，并标明标记。3.5试样保存将试样于一18℃以下冷冻保存。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。3.6提取3.6.1 猪肉、鸡肉、鱼称取4 g(精确到0.01g)均质样品到玻璃瓶中，加人20mL磷酸盐缓冲液，均质，剧烈混匀2min，离心（25℃，4000 r/min，10 min），上清液用磷酸盐缓冲液稀释4倍后进行测定。猪肉、鸡肉提取液用磷酸盐缓冲液稀释;鱼肉提取液用1%牛血清白蛋白-磷酸盐缓冲液稀释。3.6.2蛋类称取4g（精确到0.01g)均质样品到玻璃瓶中，加人20mL磷酸盐缓冲液，轻摇30min，避免乳化，吸取50αL混匀后的溶液用磷酸盐缓冲液稀释 4倍后进行测定。3.6.3 猪肝称取2g（精确到0.01g)均质样品样品到玻璃瓶中，加人20mL乙醇，均质，剧烈混匀2min，离心（25℃，4000r/min，10 min），吸取10 mL上清液于50 mL旋蒸