SNT 2439-2010鱼鳃霉病检疫技术规范.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2439—2010鱼鳃霉病检疫技术规范Protocol of quarantine for branchiomycosis of fish2010-01-10 发布2010-07-16 实施中华人民共和国发布屋拨19110转查流真伪国家质量监督检验检疫总局数码防伪 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准鱼鳃霉病检疫技术规范SN/T 2439—2010*中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045网址 www. spc. net. cn电话：6852394668517548中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本 880×12301/16　印张0.5 字数 ９ 千字2010年4月第一版　2010年4月第一次印刷印数1—1600*书号：155066·2-20701 SN/T 2439—2010前言本标准的附录 A为规范性附录,附录 B为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国湖南出人境检验检疫局、中华人民共和国北京出人境检验检疫局、中华人民共和国福建出人境检验检疫局。本标准主要起草人：唐连飞、张利峰、郑腾、朱中武、吴愈柏、江为民。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准， SN/T 2439--2010鱼鳃霉病检疫技术规范1范围本标准规定了鱼鳃霉病的现场检疫、实验室检验和结果判定。本标准适用于鱼鳃霉病的检疫。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。GB/T18088　出人境动物检疫采样3器材和试剂3.1器材3.1.1小动物解剖器具。3.1.2灭菌试管（供采集样品用）。3.1.3载玻片和盖玻片。3.1.4培养皿。3.1.5接种环或接种针。3.2设备3.2.11恒温箱（能控制温度在25℃～30℃的全温恒温箱）。3.2.2普通显微镜。3.3 试剂3.3.1沙保劳(Sabouraud)氏葡萄糖琼脂培养基(配方见附录 A 中第 A.1章)或玉米粉琼脂培养基(配方见附录 A中第 A.2章）。3.3.2乳酸苯酚溶液（配方见附录A中第A.3章）。4现场检疫4.1临床检查仔细检查全群鱼的健康状况，观察鱼是否有厌食、游动迟缓、鳃盖张开，鱼浮于水面而体表却无其他明显变化等异常表征。鱼鳃霉病的分布及症状参见附录B。4.2解剖检查对在临床检查中发现有异常表征的鱼进行解剖检查，出现下列a)或(和)b)病变的,可怀疑为鱼鳃霉病:鱼鳃黏液多，鱼鳃出血、淤血或缺血，出现红色或暗红色、灰色斑点或斑块，呈现花斑鳃；a）b）鱼鳃坏死、腐烂脱落，出现鱼鳃缺损。5采样5.1有临床症状的鱼的采样对有临床症状的鱼,挑选临床症状明显的活鱼或濒临死亡的鱼，每一批次取10尾～20尾鱼的鱼鳃1 SN/T 2439—2010作为样本。5.2外表健康无临床症状的鱼的采样对外表健康无临床症状的鱼，按GB/T18088规定,采取鱼鳃组织作为样本，采样数量如下：a）亲鱼、观赏鱼及鱼苗每批次采150尾；b）批量总数小于或等于250尾的,采23尾；批量总数为251尾～500尾的，采25尾；c）d）批量总数为501尾～1000尾的，采26尾；e）批量总数为1001尾～5000尾的，采27尾；f）批量总数大于5000尾的，采30尾。6实验室检验6.1显微镜检查取小块疑似鳃霉病鱼鳃组织，在灭菌蒸馏水中漂洗，以除去淤泥和黏液。在载玻片上滴一滴蒸馏水,取少量鳃丝制作压片，镜检。若发现有霉菌菌丝,结合临床症状和病理变化即可确诊为鳃霉病。6.2鳃霉菌分离取鳃组织用沙保劳氏葡萄糖琼脂培养塞或玉米粉琼脂培养基进行鳃霉菌分离培养。用灭菌镊子取少许鳃丝,经 50 μg/mL～100 μg/m 氯霉素溶液漂洗后在培养血虫剪碎,均匀涂布于培养基上，25℃～30℃培养 5 d～7 d,如生长出霉菌,再结合显微镜观察后即可确诊为鳃霉病。鳃霉菌在沙保劳氏葡萄糖琼脂培养基或玉米粉琼脂培养基上生长良好，发育很快。培养 2d时菌落呈白色绒毛状或棉花丝样，3d～4-d后菌落中心为黄色菌落背面呈黄褐色。在干净的载玻片中央滴一滴乳酸苯酚溶液，用接种环或针挑取少许霉菌置于液滴中，将菌丝体摊开，勿成团，轻轻盖上盖玻片进行显微镜观察。鳃霉菌菌丝无隔，不分枝或分枝很少（见附录B)。７ 结果判定7.1经 6.1 或 6.2 观察或分离到鳃霉菌的结合临床症状和病理变化确诊为鳃霉菌病。7.2现场检疫判为可疑的但6.1或6.2未观察或分离到鳃霉菌的确定为非鳃霉菌病。 SN/T 2439—2010附录A(规范性附录）主要试剂