QB_T 5449-2019口腔清洁护理用品 牙膏中荭草苷的测定 高效液相色谱法.pdf

ICS 71.100.40QB分类号：Y43中华人民共和国轻工行业标准QB/T5449-2019口腔清洁护理用品牙膏中药草苷的测定高效液相色谱法Oral care and cleansing products - Determination of orientin in toothpastes -High performance liquid chromatography2019-12-24发布2020-07-01实施中华人民共和国工业和信息化部发布 QB/T5449-2019前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由中国轻工业联合会提出。本标准由全国口腔护理用品标准化技术委员会牙膏分技术委员会（SAC/TC492/SC1）归口。本标准起草单位：广州立白企业集团有限公司、天津蓝天集团股份有限公司、中国口腔清洁护理用品工业协会、黑龙江省轻工科学研究院、广州质量监督检测研究院、浙江方圆检测集团股份有限公司。本标准主要起草人：刘庆刚、陈玉娥、肖梅、尚维、孙志勇、郭佩贤、郭长虹、吴智慧。本标准为首次发布。 QB/T5449—2019口腔清洁护理用品牙膏中草苷的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了高效液相色谱法测定牙膏中草苷含量的方法要点、试剂与标准物质、仪器、分析步骤、结果计算、回收率、标准偏差和允许差。本标准适用于牙膏产品中草苷含量的测定，注：本标准草苷的检出浓度为0.15μg/mL，定量浓度为0.50ug/mL。若取5.0g牙膏样品，定容至25mL，草苷的检出限为0.75mg/kg，定量限为2.50mg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法要点将牙膏用甲醇分散，漩涡混合器振荡、超声波提取其中的草苷，离心分离并过滤处理，取清液用带紫外检测器或二极管阵列检测器的高效液相色谱仪分析测定，通过峰面积外标法定量计算，4试剂与标准物质4.1 一般规定除非另有说明，所用试剂均为分析纯的试剂，水为符合GB/T6682规定的一级水。4.2草苷对照品纯度≥98%，CAS号：28608-75-5。4.3甲醇色谱纯。4.4磷酸色谱纯。4.50.1%磷酸水溶液用移液管准确移取1mL磷酸至1000mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀，得到0.1%磷酸水溶液。4.6有机相滤膜0.45 μm。4.7标准储备液称取草苷对照品5mg，精确至0.00001g，置于25mL容量瓶中，以甲醇定容至刻度，超声并摇匀，使之溶解。此溶液浓度为200μg/mL，置于2℃～4℃保存。4.8标准工作溶液移取上述标准储备液适量以甲醇稀释配制系列标准工作溶液，浓度分别为0.5ug/mL、1.0ug/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL、12.0μg/mL。5仪器5.1高效液相色谱仪：配紫外检测器或二极管阵列检测器。5.2C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）或性能相当的色谱柱。 QB/T5449-20195.3漩涡混合器。5.4超声波清洗器，工作频率≥35kHz，功率≥200W。5.5高速离心机，转速≥10000r/min。5.6分析天平：精度0.0001g和精度0.00001g。6分析步骤6.1试样处理牙膏试样先挤去大约20mm，称取5g牙膏（精确至0.0001g）试样于50mL具塞离心管中，加入约5mL甲醇后以漩涡混合器振荡至样品均匀，再转移至25mL容量瓶中。用约10mL甲醇分三次洗涤离心管，并将洗涤液充分转移至容量瓶中，然后使用甲醇定容至刻度。最后将样品超声提取30min，以10000r/min离心10min，将上清液过0.45μum有机膜，待测。6.2测定6.2.1色谱条件参考按照表1设定液相色谱条件。表1 液相色谱条件仪器参数设定值进样量/μL20流量/（mL/min）0.8350紫外检测器/nm二极管阵列检测器350nm，参比波长450nm柱温/℃356.2.2流动相甲醇和0.1%磷酸水溶液按25:75的体积比混合均匀，经0.45μm有机相滤膜过滤，并超声10min。6.2.3标准工作曲线准确吸取4.7制备的标准工作溶液20μL，分别注入高效液相色谱仪，按照6.2.1的色谱条件进行测定，以草苷的浓度为x轴，其相应的峰面积为y轴，绘制标准工作曲线。草苷标准溶液的液相色谱图，参照附录中的图A.1。6. 2. 4 测定准确吸取20uL经6.1处理的试样溶液，注入高效液相色谱仪测定药草苷的峰面积，由标准工作曲线计算出试样溶液中草苷的浓度。试样溶液的液相色谱图，参照附录A中的图A.2。7结果计算样品中草苷的含量X（mg/kg）按公式（1）计算：X=V××1000×N