SN 1133-2002进出口肉及肉制品中持久霉素残留量检验方法 打孔法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1133—2002进出口肉及肉制品中持久霉素残留量检验方法打孔法Method for the determination of enradine residues in meat andmeat products for import and export--Piercing method2002-08-02 发布2003-01-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 1133-2002前 言本标准中的测定方法等效采用了日本厚生省《畜、水产食品中的残留物质检验方法》中持久霉素残留量检验方法，技术内容与原方法相同，经验证后按规定格式要求作了编辑性修改。本标准的附录A是规范性附录，附录B是资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标推起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局。本标准主要起草人：袁而森、陈子红、唐丹舟、林安清、孙俐。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T出口肉及肉制品中持久霉素残留量检验方法打孔法1范围本标准规定了进出口肉及肉制品中持久霉素残留量检验的抽样、制样和打孔测定方法。本标准适用于进出口鸡肉中持久素残留量的检验。2抽样和制样2.1检验批以不超过2500件为一检验批。同一检验批的商品应具有相同特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。2.2抽样数量批量/件最低抽样数/件11~～25526~1 000201 001～~2 5002.3抽样方法按2.2规定的抽样件数随机抽取，逐件开启，每件至少取一袋作为原始样品。如每件中无小包装或有小包装，但每袋重量超过2kg者，则可用灭菌刀具在抽出的包件只能割取不少于100g样品，作为混含原始样。原始样的总量不少于2kg。混合后，置于清洁容器内，标明标记，及时送交实验密。2.4试样制备从原始样品中取出部分有代表性的样品，将可食部分用绞碎机绞碎，充分混匀。用四分法缩分出不少于500g，作为试样。装入清洁容器内，加封并表明标记。2.5试样保存将试样于一18C以下冷冻保存。注：在抽样及制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。3测定方法3.1方法提要将试样用水均质后，再以丙酮提取试样中持久霖素残留，提取液经浓缩后，加人正丁醇和稀盐酸净化，用氢氧化钠调整pH值，减压浓缩至干，最后再用甲醇-磷酸盐缓冲液溶解作为试液，利用试液中持久霉素残留与枯草杆菌作用产生抑菌，根据抑菌圈大小用标准曲线法定量。3.2试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水或去离子水。标准品及标推溶液均以效价计。3.2.1丙酮。1 SN/T 113320023.2.2丙酮-水溶液：60%（V/V）。3.2.3 正丁醇。3.2. 4 盐酸溶液:4 mol /L、1 mol /L、0. 005 mol /L。3.2.5氢氧化钠溶液：1mol/L。3.2.6甲醇-磷酸盐缓冲液（pH8.0士0.1）：称取13.3g磷酸二氢钾（精确至0.1g），溶解于900mL水中，另取6.2g氢化钾溶解于100ml.水中，两种混合均匀。取其300ml.与700ml甲醇混合即可。3.2.7甲醇水溶液：甲醇十水（4+5）。3.2.8三羟甲基氨基甲烷缓冲液：称取6.06g三羟甲基氨基甲烷，溶解于40ml1mol/L盐酸加水定容至1000 ml.，115C高压灭菌15 min，灭菌后调整pH值为 7.0士0.1。3.2.9持久霾素标准品。3.2.10持久舞素标准贮备液：准确称取一定量的本标准品（精确至0.0001g），用甲醇-水溶液（3.2.7）配制成500μg/mL的标准贮备液，于5C冰籍中保存，可使用8天。3.2.11持久舞素标准工作液：吸取一定量的持久霉素贮备液，用三羟甲基氨基甲烷缓冲液（3.2.8)稀释成（0.15、0.30、0.60、1.20、2.40）μg/mL浓度的标准工作液备用。该溶液均须当日配制。3.2.12实验菌种：枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。3.2.13培养基I：见附录A中A.1。3.2.14培养基I：见附录A中A.2。3.2.15培养基Ⅱ：见附录 A中 A.3。3.3仪器和设备3.3.1培养Ⅲ：内径90mm，底部平整光滑的玻璃或塑料Ⅲ，具备陶瓦盖。3.3.2打孔器：内径8mm土1mm的不锈钢制品。3.3.3游标卡尺：测量范围0mm～200mm，精度0.02mm或抑菌圈测量仪。3.3.4均质器：不低于10 000r/min。3.3.5离心机：不低于8000 r/min。3.3.6恒温培养箱：36℃士1C，隔板保持水平。3.3.7旋转蒸发器。3.4测定步骤3.4.1试液制备称取10g试样（精确至0