NY_T 2361-2013蔬菜夜蛾类害虫抗药性监测技术规程.pdf

ICS 65.100B 17NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 2361—2013蔬菜夜蛾类害虫抗药性监测技术规程Guideline for insecticide resistance monitoring of noctuid larvae onvegetables2013-08-01实施2013-05-20发布中华人民共和国农业部5发布 NY/T2361-2013前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草-本标准出农业部种植业管理司提出并归口。本标准起草单位：全国农业技术推广服务中心、中国农业大学。本标准主要起草人：张州、高希武、邵振润、李永平、冯凤娟、郭亭亭、李永丹。1 NY/T2361—2013蔬菜夜蛾类害虫抗药性监测技术规程1范围本标准规定了蔬菜夜蛾类害虫抗药性监测的基本方法。本标准适用于危害蔬菜的甜菜夜蛾（Spodopterue.riguuHubner）、斜纹夜蛾（ProdeniulituruFahricius)等夜蛾类害虫对具有触杀、胃毒作用杀虫剂抗约性监测。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2. 1抗药性insecticideresistance中杀虫剂的使用，在昆虫或螨类种群叫发展并可以遗传给后代的对杀死正常种群药剂剂量的忍受能力。2. 2F,代F,generation从田间采集害出的卵或幼虫，室内饲养，繁殖后得到的第·代幼虫，2. 3敏感性基线susceptibilitybaseline通过生物测定方法得到的害虫敏感品系（或种群）对杀出剂的剂量反应曲线。2. 4点滴法topical applicationmethod通过·定的具或设备将内酮等溶解的药剂滴加到靶标昆虫体壁进行的生物测定方法2. 5浸叶法leaf-dippingmethod将浸过药液的叶碟置于含有琼脂或保湿滤纸上，接人靶标昆虫进行的生物测定方法。3试剂与材料试剂为分析纯试剂。3.1生物试材3.1.1试虫甜菜夜蛾：SpodopterueriguaHibner。斜纹夜蛾：ProdenialiluraFabricius。3.1.2供试植物供试植物：未被药剂污染的甘蓝（Brussicuoleruceu）。3.2试验药剂原药或母药。4仪器设备4.1实验室通常使用仪器设备 NY/T 2361—20134.2特殊仪器设备电子天（感量0.1mg）；培养Ⅲ（小培养Ⅲ：直径5cm高1.2cm；大培养ml：直径18.5cm，高3cm）；养虫笼（长40cm×宽40cm×高40cm）；移液管或移液器（200μl，1000μl.5000μl.）；容量瓶（10ml.25ml）；微量点滴器：容积通常为0.4μl.～0.6ul（精确度为0.1uL）：恒温培养箱、恒温养虫室或人工气候箱。5试验步骤5.1试材准备5.1.1试虫试虫采集在监测田按抽样方法采集靶标昆虫（甜菜夜蛾、斜纹夜蛾）幼虫或卵，幼虫不少于200头，卵块不少于30块。试虫饲养采集的幼虫或卵块在室内饲养到成虫分批产卵，取F：代3龄初期幼虫供试。5.1.2供试植物使用新鲜、洁净、无农药污染的甘蓝叶片。5.2药液配置将药剂原药或母药溶于有机溶剂（如丙酮、乙醇等）.按要求配成定浓度的母液。5.3处理方法5.3.1点滴法挑取个体大小一致的3龄幼虫，每10头放人-个培养Ⅲ内.称重。用丙酮或其他易挥发的有机溶剂将丹液稀释成系列浓度（通过预实验确定药剂的浓度系列范围.最低浓度时死T：率小于20%.最大浓度时死亡率人于80%）。用微量点滴器将0.2u1.～0.51.杀业剂溶液点滴在幼虫的前胸背板上。每个处理点滴20头幼虫，单头饲养，以点滴相应体积的溶剂作为空白对照，实验重复3次。将处理后的试虫放人具有甘蓝叶片的培养Ⅲ内。5.3.2浸叶法用含0.05%TritonX-100的蒸馏水稀释母液成系列梯度浓度（通过预实验确定药剂的浓度系列范围，最低浓度时死亡率小于20%，最人浓度时死亡率大于80%），每质量浓度药液量不少于200mL。将清洗十净的甘蓝叶片浸于不同浓度的溶液中10，取出后在室内晾下至表面无游离水。用0.05%TritonX-100水溶液浸渍的叶片作为对照。将晾于的叫片放人培养Ⅲ或试管中.用滤纸或琼脂保湿，接人3龄幼虫，单头饲养.每个处理10头幼虫，重复3次。5.4结果检查根据杀虫剂的速效性分别于接虫后48h-96h后检查。氯出苯甲酰胺等双酰胺类、氟铃脲等昆虫儿丁质合成抑制剂、阿维菌素等微生物制剂，J药后72h～96h调查·速效性好的药剂于药后48h调查。以小毛笔或尖锐镊了轻触虫体，不能协调运动的个体视为死亡。6数据统计与分析6.1死亡率计算方法2 NY/T2361—2013根据调查数据，计算各处理的校正死亡率。按式（1)和式（2)计算，计算结果均保留到小数点后两位。KP, :X 100(1)N式中：P, -