常规培养基的制作演示文稿.pptVIP

1.5血液 培养基中加入血液，可增加蛋白质、多种氨基酸、糖类、无机盐等营养成分，同时还能提供辅酶、血红素等特殊生长因子，供某些对营养要求高的细菌生长繁殖之用。 此外，含血液的培养基还可以用于观察细菌溶血反应，作为细菌鉴定的一项指标。 当前第30页\共有80页\编于星期三\4点 血平板溶血现象 当前第31页\共有80页\编于星期三\4点 1.6鸡蛋和动物血清 鸡蛋和动物血清对一部分细菌来说是必须营养成分，可作为养料直接被细菌利用。 常用于制备特殊培养基，如Braid-Praker琼脂培养结核杆菌的罗氏培养基和白喉棒状杆菌的吕氏血清培养基等。 此外鸡蛋和血清还具有凝固剂作用，便于观察细菌菌落形态和生长情况。 当前第32页\共有80页\编于星期三\4点 1.7生长因子 在细菌生长繁殖过程中，需要一定的辅助生长因子。 生长因子根据化学结构及代谢功能不同分为三大类：维生素、氨基酸和嘌呤与嘧啶。 细菌对这些物质需要量不大，但如缺少，某些细菌就不能生长。通常肝浸液、肉浸液、酵母浸液和血液中含有大部分生长因子，但有时需要另外加入。 当前第33页\共有80页\编于星期三\4点 1.8无机盐类 制备培养基时常加入氯化钠和磷酸盐，这是因为细菌生长繁殖需要无机盐类，如K、Na、Mg、Fe、磷酸盐、氯化物等。 其中，有的需要量极微，如Mn、Cu等。这些无机离子除作为构成菌体的成分外，还是酶的激活剂，并起维持一定渗透压的作用。 当前第34页\共有80页\编于星期三\4点 2.水分 细菌细胞75%-80%由水组成。 水是细菌营养、代谢过程中不可缺少的物质；水又是良好的溶剂，培养基中许多营养物质均需溶于水才能被细菌吸收。 蒸馏水和离子交换水不含杂质，在制备培养基时，一般需使用蒸馏水和离子交换水。 无蒸馏水可以用自来水代替，因其中含有某些微量元素，有利于细菌生长，但应先煮沸使部分盐类沉淀，过滤澄清后再使用。 当前第35页\共有80页\编于星期三\4点 3.凝固物质 配制固体培养基的凝固物质有琼脂、明胶和蛋白、血清等，最常用琼脂，特殊目的也可用明胶等。 琼脂是从石花菜等海藻中提取出来的一种胶状物质，属多糖类，一般不被细菌分解利用，无营养价值。 琼脂在98摄氏度以上融化，在低于45摄氏度时则凝固成胶冻状态。 用途不同的培养基中琼脂含量不同，固体培养基含量为2%-2.5%，半固体培养基琼脂含量为0.3%-0.5%。 当前第36页\共有80页\编于星期三\4点 4.抑制剂和指示剂 抑制剂和指示剂是由于选择、鉴定和判断结果的需要而加入到培养基中的物质，并不为细菌生长繁殖所需。 4.1抑制剂加入目的是抑制非检出菌生长或其少生长，以利于检出菌生长。根据所要抑制选择不同抑制剂。 常用抑制剂有胆盐、煌绿、玫瑰红酸、亚硫酸钠、四硫磺酸盐、叠氮钠及一些染料和某些抗生素等。在选择抑制剂时需注意抑制剂应具有选择性抑制作用。 当前第37页\共有80页\编于星期三\4点 4.2指示剂是为方便了解和观察细菌是否利用和分解培养基中糖、醇类物质，而在培养基中加入的成分。 常用指示剂多为酸碱指示剂，如酚红、溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝、中性红、甲基红、碱性复红等，还有氧化还原指示剂，如亚甲蓝。 此外，一些新的氧化还原指示剂如四氮唑盐类等，也已广泛用于细菌快速培养和鉴定以及快速药敏试验方面。 当前第38页\共有80页\编于星期三\4点 三、培养基配制原则： （1）目的要明确：根据微生物的种类、培养目的等确定配制培养基的种类，因为不同的微生物对培养物质的需求不同。 （2）营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。 （3）pH要适宜：各种微生物适宜生长的pH范围不同。 细菌pH为：； 放线菌pH为：； 真菌pH为：。 当前第39页\共有80页\编于星期三\4点 第二节 实验内容 当前第40页\共有80页\编于星期三\4点 一、实验目的 掌握在真菌、细菌、放线菌分离培养工作中常用的合成和半合成培养基配制的一般原理、方法、程序、环节及要求和注意事项。 当前第41页\共有80页\编于星期三\4点 二、实验原理 培养基的配制是进行微生物学实验工作的重要基础。由于微生物种类及代谢类型的多样性，因而用于培养微生物培养基的种类也很多，它们的配方组成及配制方法虽各有差异,但一般培养基配制的常规程序却大致相同，例如器皿的准备，培养基的配制与分装，棉塞的制作，培养基的灭菌，斜面与平板的制作以及培养基的无菌检查等基本环节。 当前第42页\共有80页\编于星期三\4点 肉膏蛋白胨培养基是一种广泛用于培养细菌的培养基，属于半合成培养基。其主要成分是牛肉膏、蛋白胨和NaCl。它们分别提供微生物生长繁殖所需要的碳源、氮源、能源、生长因子和无机盐等。 培养基都是水溶液，这是因为一切生物细胞都必须要