NY_T 2332-2013红参中总糖含量的测定 分光光度法.pdf

CS 11.1203 38NY中华人民共和国农业行业标准NY/T2332—2013分光光度法红参中总糖含量的测定Determination of total sugars in red ginseng-Spectrophotometry2013-08-01实施2013-05-20发布中华人民共和国农业部发布 NY/T言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草本标准由农业部种植业司提出并归口。本标准起草单位：农业部参茸产品质量监督检验测试中心、吉林农业大学。本标准主要起草人：李月茹、王艳红、钟岩、任谓明、赵丹。I ACENTER+QGRICULTURALHSOONSONSSUQ NY/T2332—2013红参中总糖含量的测定分光光度法1范围本标准规定了用分光光度法测定红参中总糖（以葡萄糖计）的含量。本标准适用于红参中总糖含量的测定。本标准方法的线性范围为0.012mg~1.8.mg本标准方法的定量限为1.2%2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件·其必威体育精装版版本（包括所有的修改单)适用于本文件分析实验室用水规格和试验方法GB/T 66823原理N试样中水溶性糖和水木溶性多糖经盐酸水解后转化成还原糖，与-3,5-二二硝基水杨酸共热后被还原成棕红色的氨基化合物在波长520nm处测定吸光度，吸光度值与还原糖含量成正比。A4试剂和材料工除非另有说明,均使用分析纯试剂，水为GB/T 6682规定的三级水。RA4.110%盐酸溶液：27ml.盐酸加水稀释至l00ml4.210%氢氧化钠溶液：称取100g氢氧化钠加水溶解并稀释至1900ml.4.330%氢氧化钠溶液称取30g氢氧化钠加水溶解并稀释至10gml。4.41%3.5-二硝基水杨酸溶液：称取1og/3.5-二硝基水杨酸加水溶解并稀至A00Qml.。全4.5显色剂(DNS试剂)A甲液：称取6.9g结晶苯酚溶于,5.2ml.氢氧化钠溶液（(4.2)中，,并稀释至69,ml，在此液中加a)E人6. 9g 亚硫酸氢钠·溶解即得溶解后，再加人880ml乙液：称取255g酒石酸钾钠：加以300mL氢氧化钠溶液（42）中b）aa3.5-二硝基水杨酸溶液(4.4)年,混匀即得。将甲液与乙液混合摇匀，贮于棕色试剂瓶冲在拿温下置7d后方可使用（4℃冰箱冷藏，保质期6个月）。4.6葡葡糖标准品（C.Hl=O）：含量犬于99.5%。4.7葡萄糖标准溶液Lo(CH20),）=1mg/mlJ：准确称取葡葡糖标准品10mg，加少量水溶解并稀释定容至10ml.，摇匀，备用（现用现配）。4.8碘化钾-碘溶液：称取1g碘和10g碘化钾溶于50mL水中，再加2ml.冰乙酸，加水稀释至100 ml.4.90.1%酚酸指示剂：称取0.1g酚酥，加95%乙醇溶解并稀释至100mL。4.10D101型大孔吸附树脂。5仪器和设备5.1分光光度计。1 NY/T 2332—20135.2分析天平：感量士0.0001g。5.3分析天平：感量士0.01g。5.4恒温水浴锅。5.5涡旋振荡器。5.6粉碎机：配备0.25mm孔径的金属筛网。6分析步骤6.1试样制备取代表性样品约100g，用粉碎机粉碎至通过0.25mm孔径筛，装入样品瓶中备用。6.2试样前处理称取1g试样（精确到0.1mg），置50ml.具塞刻度试管中，用量筒加人25ml.盐酸溶液（4.1），沸水浴中加热20min后用碘化钾一碘溶液（4.8）检查水解程度（取1滴水解液于白瓷板上.加人1滴碘化钾-一碘溶液，若不显蓝色.则已水解完全；如显蓝色，则未水解完全，继续水解，每2min检查一次水解程度，直至不显蓝色）。水解完全冷却后将其全部转移至100mL锥形瓶中，加入0.5ml酚酞指示剂（4.9），用氢氧化钠溶液（4.3）中和至溶液呈红色，加人5gD101型大孔吸附树脂（4.10），在涡旋振荡器上振荡50min后过滤，加水定容至100ml。再准确吸取10.0ml.上述溶液置100ml.容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液为试样测试液。6.3标准曲线的制定分别吸取0ml.、0.2ml.、0.4mL、0.6mL、0.8ml.、1.0ml.、1.2mL和1.4ml.的葡萄糖标准溶液（4.7)至25ml.的具塞刻度试管中.此标准溶液葡萄糖含量相当于0mg、0.2mg、0.4mg、0.6mg、0.8mg、1.0mg、1.2mg和1.4mg，加水至2ml.，加人2ml.DNS试剂（4.5）.然后将试管放入沸水浴中加热6min，立即在冰水中冷却后，转移至25ml.容量瓶中，定容摇匀，用分光光度计在波长520nm处测定吸光度，以葡萄糖含量为横坐标：吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。6.4测定准确吸取1