新冠核酸检测技术方案.pdf

新冠核酸检测技术方案 为落实《国务院应对新冠疫情联防联控机制关于做好新 冠疫情常态化防控工作的指导意见》（国发明电〔2020〕14 号）和省应对新冠疫情应急指挥部要求，进一步提升全省新 冠核酸检测能力，全面推进扩大核酸检测，使新冠核酸检测 保“量”保“质”保“安全”，为做好常态化疫情防控工作 提供有力技术支撑,制订此技术方案。 一、适用范围 适用于 XX 省区域内开展新冠核酸检测的实验室。 二、生物安全防护要求 （一）防护用品。医用外科口罩、N95 及以上防护口罩、 全面型呼吸防护器或护目镜和面屏、医用防护服、防水隔离 衣、工作服、工作鞋、乳胶手套、防水靴套、医用防护帽。 （二）相关操作过程人员生物安全防护要求。样本采集、 样本核酸提取人员须三级生物安全防护：N95 口罩（必要时 可在外加戴 医用外科口罩）、医用防护帽、工作服、外着防 护服（必要时加戴穿防水隔离衣）、工作鞋、防水靴套、双 层乳胶手套、护目镜（必要时可加戴面屏）或全面型呼吸防 护器。 1 标本运输/接收人员须二级生物安全防护：工作服、工 作鞋、防水隔离衣、医用防护帽、医用外科口罩或N95 口罩、 乳胶手套；特殊情况时，可升级为三级生物安全防护。 核酸扩增检测人员须一级生物安全防护：医用外科口罩、 乳胶手套、工作服、工作鞋、医用防护帽。 三、人员要求 （一）掌握实验室生物安全知识，熟悉生物安全三级实 验室个人防护操作。 （二）实验室操作人员具备核酸提取和PCR 扩增等分子 生物学操作能力。 （三）标本采集人员接受过新冠标本采集操作培训，实 验室检测人员接受过新冠核酸检测技术培训。 四、核酸检测实验室环境要求 新冠核酸检测实验室应至少设置三个区域：试剂准备区、 标本制备区、核酸扩增区。各区域可以采用集中或分散设置 形式，但物理空间上必须完全相互独立，各区域在使用中应 当始终处于完全的分隔状态，不能有空气的直接相通。标本 制备区应为生物安全二级实验室，宜为负压。如为常压，应 当可以通风换气，同时，必须设置缓冲区，以满足实验室个 人防护装备穿脱的需求。 五、核酸检测实验设备要求 2 （一）试剂准备区。超净工作台，冰箱，混匀器，移液 器，离心机。 （二）标本制备区。冰箱，混匀器，移液器，生物安全 柜，核酸提取仪，离心机。 （三）核酸扩增区。荧光PCR 扩增仪。 六、试剂耗材要求 （一）核酸提取试剂和检测试剂需具备三证，并通实验 室性能验证。 （二）移液器枪头应为带滤芯枪头。 七、标本采集 （一）采集对象。需要进行新冠核酸检测的个体。 （二）采集准备。咽/鼻拭子、采样管、采样杯、三级 生物安全个人防护装备。 （三）采集标本类型。新冠核酸检测的样本类型一般包 括上呼吸道的咽拭子、鼻拭子、鼻咽拭子，下呼吸道的深咳 痰液、呼吸道抽取物、支气管灌洗液、肺泡灌洗液和肺组织 活检标本。为提高呼吸道样本的新冠核酸阳性检出率，兼顾 采样的便捷性，首选深咳痰，其次鼻咽拭子，最后才是咽拭 子,也可同时采集 同一人的鼻拭子和咽拭子并放入 同一病毒 采样液中。 （四）标本采集方法。 3 1.咽拭子：被采样人坐下，头后倾，张大嘴，并发“啊” 音。咽拭子越过舌根到咽后壁及扁桃体隐窝、侧壁等处。先 用拭子适度用力来回擦拭双侧咽扁桃体至少 3 次，然后再咽 后壁至少 3 次。取出拭子，避免触及舌头、悬垂体、口腔粘 膜和唾液。将拭子头浸入含 3ml 采样液的管中。靠近顶端处 折断无菌拭子杆，尾部弃去，旋紧管盖。 2.鼻咽拭子：被采样人头部后仰 （约70。），保持不动。 用鼻拭子估测耳根到鼻孔距离。自鼻孔垂直面部方向插入， 深入距离最少应达耳垂部位到鼻尖长度的一半。遇到阻力后 即到达后鼻咽，应停留数秒吸取分泌物（一般要求 15～30s）， 应旋转拭子 3～5 次。宜轻轻旋转取出拭子，拭子头浸入装 有 3ml 采样液中。顶端处折断无菌拭子杆，尾部弃去