NYT 1458-2007饲料中盐酸异丙嗪、盐酸氯丙嗪、地西泮、盐酸硫利达嗪和奋乃静的同步测定 高效液相色谱法和液相色谱质谱联用法.pdf

ICS 65.120B 46NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1458—2007饲料中盐酸异丙嗪、盐酸氯丙嗪、地西泮、盐酸硫利达嗪和奋乃静的同步测定高效液相色谱法和液相色谱质谱联用法Simultaneous determination of promethazine hydrochloride, chlopromazine hydrochloride , diazepam , perohenazine andthioridzine hydrochloride in Feeds by high performance liquidchromatography and liquid chromatography-mass spectrometry2007-12-18 发布2008-03-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/ T 1458--2007前言本标准的附录 A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部畜牧业司提出。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。本标准由农业部饲料效价与安全监督检验测试中心(北京)、中国农业大学负责起草。本标准主要起草人：杨文军、张丽英、常碧影、王宗义、贺平丽。 NY/T 1458--2007饲料中盐酸异丙嗪、盐酸氯丙嗪、地西泮、盐酸硫利达嗪和奋乃静的同步测定高效液相色谱法和液相色谱质谱联用法1范围本标准规定了以高效液相色谱法(HPLC)和液相色谱质谱联用法(LC-MS)同步测定饲料中盐酸异丙嗪、盐酸氯丙嗪、地西泮、盐酸硫利达嗪和奋乃静的方法。本标准适用于配合饲料、浓缩饲料及添加剂预混合饲料的测定，每种药物最低检出浓度 HPLC法为 1 mg/ kg;LC- MS 确证法为 0. 2 mg/ kg。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本适用于本标准。GB/T 6682　分析实验室用水规格和试验方法GB/T 14699.1　饲料　采样3原理用酸性乙腈提取试样中的5 种药物。提取液经氮气吹干，用稀盐酸溶解后，通过固相萃取小柱(SPE)净化,在 HPLC反相柱上分离,紫外检测器定量测定，质谱法确证。4试剂和溶液除非另有说明，在色谱分析中仅使用确认为色谱纯的试剂，其他试剂选用分析纯即可。水为符合GB/T 6682一级用水的规定。4.1 甲醇。4.2乙腈。4.3无水甲酸。4.4 氨水。4.5盐酸。4.60.1%的甲酸溶液：将1mL无水甲酸(4.3)用水定容至1000mL,通过0.45μm滤膜。4.7样品上柱稀释液和淋洗液 1:c(HCl)=0.02mol/L的盐酸溶液。将 1.67mL盐酸(4.5)用水定容至 1 000 mL。4.8 淋洗液2:c(HCI)=0.1mol/ L的盐酸溶液。将8.33mL盐酸(4.5)用水定容至 1000 mL。4.9淋洗液3:甲醇。4.10洗脱液:2%氨水的甲醇溶液。将2mL氨水(4.4)用甲醇定容至100mL。4.11中性洗脱液：取洗脱液(4.10)97.5mL,加人2.5mL无水甲酸(4.3)混匀,现配现用。4.12提取液:c(HCl)=0.5mol/L的盐酸溶液。将 4.17 mL盐酸(4.5)用水定容至 100 mL和乙腈(4. 2),(1+9,0/~)。 NY/T 1458--20074.13标准溶液。4.13.1标准储备液：分别称取盐酸异丙嗪、盐酸氯丙嗪、地西泮、盐酸硫利达嗪和奋乃静的标准品0.1000g(根据所购对照品纯度计算称样量）,分别置于100mL容量瓶中，用甲醇(4.1)溶解并定容至刻度,其浓度各分别为 1 mg/mL。冰箱中冷藏,有效期为一周。4.13.2标准工作液：分别移取五种标准储备液(4.13.1)于同一棕色容量瓶，用中性洗脱液(4.11)依次稀释配制成标准工作液,浓度分别为0.1 μg/mL、0.5μg/mL、1 μg/mL、5μg/mL和10 μg/mL。现配现用。5仪器设备5.1分析天平：精度0.1mg。5.2超声波清洗器。5.3 离心机。5.4往复式振荡器。5.5旋涡混合器。5.6高效液相色谱质谱联用仪：具有Cl8柱、紫外检测器和大气压电离源。5.7反相Ci:和阳离子混合型固相萃取纯化小柱(简称“SPE)或类似小柱(1mL,30mg)。5.8氮吹仪。5.9固相萃取仪。6试样制备按GB/T14699.1—2005规定的方法采样，选取有代表性的饲料样品1000g，用四分法缩至200g左右，粉碎并全部通过0.45mm筛，混匀，装人磨口瓶中，低温避光保存备用。7 测定步骤7.1提取称取适量试样(表1）,精确至 10 mg