SN_T 2552.11-2010乳及乳制品卫生微生物学检验方法 第11部分：蜡样芽胞杆菌的分离与计数.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2552.11—2010乳及乳制品卫生微生物学检验方法第11部分：蜡样芽孢杆菌的分离与计数Microbiological examination for milk and milk products hygiene-Part 11:Isolation and enumeration of Bacillus cereus2010-05-27发布2010-12-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局数码防伪 SN/T2552.11—2010前言SN/T2552《乳及乳制品卫生微生物学检验方法》分为十三个部分：第1部分：取样指南；第2部分：检验样品的制备与稀释；第3部分：酵母、霉菌菌落计数；第4部分：嗜冷菌微生物菌落计数；第5部分：沙门氏菌检验；第6部分：柠檬酸杆菌检验；第7部分：阴沟肠杆菌检验；第8部分：普通变形杆菌和奇异变形杆菌检验；第9部分：克雷伯氏菌检验；免疫荧光法；第10部分：阪崎肠杆菌检验第11部分：蜡样芽孢杆菌的分离与计数；第12部分：单核细胞增生李斯特氏菌检测与计数；第13部分：假单孢菌属的分离计数。本部分是SN/T2552的第11部分。本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本部分参照了ISO7932《食品和动物饲料微生物学疑似蜡样芽孢杆菌计数水平方法30℃菌落计数技术》(ISO7932Microbiologyoffoodandanimalfeedingstuffs—Horizontalmethodforthee-numeration of presumptive Bacillus cereus—Colony-count technique at 30 degrees C)和美国FDA《细菌分析手册第14章蜡样芽孢杆菌》（BacteriologicalAnalyticalManual-chapter14Bacillus cereus）。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国吉林出人境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院。本部分主要起草人：王振国、罗雁非、蔡阳、赵贵明、刘金华。 SN/T2552.11—2010乳及乳制品卫生微生物学检验方法第11部分：蜡样芽孢杆菌的分离与计数1范围SN/T2552的本部分规定了乳及乳制品中蜡样芽孢杆菌的分离与计数方法。本部分适用于乳及乳制品中蜡样芽孢杆菌的分离与计数。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。SN/T2552.1乳及乳制品卫生微生物学检验方法第1部分：取样指南SN/T2552.2乳及乳制品卫生微生物学检验方法第2部分：检验样品的制备与稀释SN/T1538.2一2007培养基制备指南第2部分：培养基性能测试实用指南3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3. 1Bacillus cereus蜡样芽孢杆菌一种需氧革兰氏阳性芽孢杆菌，普遍存在于土壤、蔬菜及生品和熟品食物中，繁殖能力强，它是导致食物中毒的常见致病微生物。4原理4.1利用蜡样芽孢杆菌不发酵甘露醇和产生卵磷脂的特性，在MYP平板上形成典型菌落进行分离。4.2利用蜡样芽孢杆菌的溶血特性，接种绵羊血琼脂平板进行二次筛选4.3将疑似菌落纯化后初步进行生化确证，鉴定到蜡样芽孢杆菌群。4.4通过群内生化鉴别，鉴定到蜡样芽孢杆菌种。4.5按确证为阳性的蜡样芽孢杆菌数计算每克或每毫升样品中的蜡样芽孢杆菌数。55培养基和试剂5.1甘露醇卵黄多粘菌素B琼脂（MYP)：见附录A第A.1章。5.2绵羊血琼脂：见附录A第A.2章。5.3营养琼脂（NA）：见附录A第A.3章。1 SN/T2552.11—20105.4酚红葡萄糖肉汤：见附录A第A.4章。5.5硝酸盐肉汤：见附录A第A.5章。5. 6 酪氨酸琼脂:见附录 A第 A.6 章。5.7溶菌酶肉汤：见附录A第A.7章。5.8改良培养基：见附录A第A.8章。5.9改良VP培养基：见附录A第A.9章。5.10动力试验培养基：见附录A第A.10章。6设备和材料6.1干燥灭菌（烘箱）和湿热灭菌（高压灭菌器）设备6.2拍打式均质器。6.3水浴箱：45℃±2℃。6.4 温度计：量程1℃~55℃,分刻度 0. 16.5培养箱：30℃±1℃和35℃±1℃6.6干燥橱或烘箱：37℃±1℃和555℃±16.7 pH计:要求在25℃时精确校准到土0.1pH单位。6.8吸管：10mL和1.0mL，分度分别为0.5mL和0.1mE6.99“L”型玻璃涂布棒：直径3.小有直角的玻璃或塑料棒；切面端应平滑。6.10接种环：3mm直径。6.11天平：量程2000g，灵敏度6. 12