NY_T 1154.16-2013农药室内生物测定试验准则 杀虫剂 第16部分：对粉虱类害虫活性试验 琼脂保湿浸叶法.pdf

ICS 65.100B 17NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1154.16—2013杀虫剂农药室内生物测定试验准则第16部分：对粉虱类害虫活性试验琼脂保湿浸叶法Guideline for laboratory bioassay of pesticidesPart 16: Leaf-dipping method for insecticide activity to whitefly2013-08-01实施2013-05-20发布中华人民共和国农业部发布 NY/T1154.16—2013前 言杀虫剂》为系列标准：NY/T1154《农药室内生物测定试验准则点滴法；第1部分：触杀活性试验夹毒叶片法；第2部分：胃毒活性试验第3部分：熏蒸活性试验锥形瓶法；连续浸液法；-第4部分：内吸活性试验一浸渍法；第5部分：杀卵活性试验..第6部分：活性试验没虫法；一一第7部分：混配的联合作用测定；--第8部分：滤纸药膜法；-第9部分：喷雾法；第10部分：人饲料混药法；第11部分稻茎浸渍法；第12部分：叶螨玻片浸渍法；-第13部分：叶碟喷雾法；第14部分：浸叶法；.——第15部分：地下害虫浸虫法；—一第16部分：对粉虱类害虫活性试验琼脂保湿浸叶法；本部分是《农药室内生物测定试验准则杀虫剂》的第16部分。本部分按照GB3/T1.12009给出的规则起草。本部分由农业部种植业管理司提出并归口。本部分起草单位：农业部农药检定所。本部分主要起草人：李贤宾、张友军、王晓军、张文君、陈立萍、聂东兴、曹艳。 NY/T1154.16—2013农药室内生物测定试验准则杀虫剂第16部分：对粉虱类害虫活性试验琼脂保湿浸叶法1范围本部分规定了琼脂保湿浸叶法测定杀虫剂生物活性的基本要求和方法。本部分适用于杀虫剂对粉虱类害虫成虫的触杀和（或）胃毒活性测定，适用于农药登记用杀虫剂室内生物测定。2试验条件2.1试验靶标试验靶标为粉虱类害虫成虫：不同生物型的烟粉虱Bemisiatabaci（Gennadius）、温室白粉虱Trialeurodes vaporirum(Westwood)等。2.2仪器设备2.2.1打孔器（孔径22mm）；2.2.2底玻璃管（长78mm，直径22mm）；2.2.3微波炉；2.2.4恒温培养箱或恒温养虫室。3试验设计3.1药剂试验药剂采用原药（或母药），并注明通用名、含量、生产厂家。3.2对照药剂采用已登记注册且生产上常用农药的原药（或母药），其化学结构类型或作用方式与试验药剂相同或似。3.3试验步骤3.3.1配制液体琼脂用蒸馏水配制成浓度为15g/L的琼脂。称取琼脂粉于角瓶中，加水后移置于微波炉中，加热至琼脂完全溶解。稍冷却后，用移液器吸取2ml.液体琼脂，加入到平底玻璃管底部，液体琼脂冷却凝固，管壁蒸汽挥发干净后备用。应避免琼脂沾染管壁及凝固琼脂产生气泡。3.3.2药剂配制选用合适的有机溶剂(丙酮、二甲基亚砜、甲醇等），将原药（或母药)配制成母液，再用含有适量表面活性剂如0.1%TritonX-100(或0.1%叶温80)的水溶液稀释。根据药剂活性，按照等比或等差的方法配制5个～7个系列质量浓度。每个质量浓度药液量不少于50mL。药液中的有机溶剂终浓度≤10g/ Lo3.3.3药剂处理用打孔器将新鲜、平展的寄主叶片打成叶碟，打取时尽量避免选取叶脉大而粗的部位。将叶碟浸人待测药液中10s后，取出晾下，用镊子将叶片正面朝下平铺于已加好琼脂的平底玻璃管中，叶碟须与琼脂及管壁严密紧贴，不留空隙。每处理不少于4次重复，并设不含药剂的处理作对照。- NY/T1154.16—20133.3.4接虫与计数将铺好叶碟的玻璃管，倾斜倒放在粉虱寄主植物上，轻拍植株或用嘴吹，使粉虱进入管内，每管20头～25头，将管口朝下待粉虱飞（爬）人管底叶碟处时，用棉塞塞口至距离管底大约15mm的位置，使粉虱强制性的处于管底的叶碟上。试虫接入约10min后，逐一检查并记录每管内的活虫数（总虫数）。3.3.5饲养与观察将处理后的试虫倒置于温度为(25士1)℃、相对混度60%～80%、光周期为1：D14h：10h条件下饲养和观察，特殊情况可以适当调整试验环境条件。4调查处理后48h逐--检查并记录每管内的死虫数，试虫不动者或不能正常行动即认为死亡。根据试验要求和药剂特点，可缩短或延长调查时间。5数据统计与分析5.1计算方法根据调查数据，计算各处理的校正死亡率。按式（1）和式（2)计算，计算结果均保留到小数点后两位。KP :X 100.(1)N甲:P-死亡率，单位为百分率（%）；K-表示死亡虫数，单位为头N表示处理总虫数，单位为头。PPPX 100(2)1-P.式中：P, 校正死亡率，单位为百分率（%）；P，一处理死亡率,单位为百分率（%）;P。-一空白对照死亡率，单位为百分率（%）。对