SN 1059.3-2002进出口食品平板菌落计数--滤膜法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1059.3—2002滤膜法进出口食品平板菌落计数Plate count for bacterial colonies in food for importand exportMembrane filter method2002-01- 16 发布2002-06-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准进出口食品平板菌落计数滤膜法SN/T1059.3-2002中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045电话：6852394668517548中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*开本880×12301/16印张1/2字数10千字2002年5月第一版2002年5月第一次印刷印数1-2000书号：155066·2-14386定价6.00元网址版权专有·侵权必究举报电话：（010SN/T1059.3—2002前言本标准是按照GB/T1.1一1993《标准化工作导则’第1单元：标准的起草与表述规则第1部分：标准编写的基本规定》进行编写的。其中平板菌落计数滤膜法中的培养基、培养温度和滤膜法等内容是参考美国公职分析化学家协会（AOAC)《公定分析方法》1995年第16版17.2.05），结合SN0168-1992《出口食品平板菌落计数》样品制备中内容，并在实验的基础上编写而成。本标准的附录A是标准的附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国天津出人境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人：陈子红、侯丽萍、唐丹舟、张思传、孙俐。本标准首次发布。 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准进出口食品平板菌落计数滤膜法SN/T1059.3—2002Plate countforbacterial coloniesinfoodfor importand export-Membrane filter method1范围本标准规定了进出口食品中平板菌落计数滤膜法。本标准仅适用于进出口方便面、膨化食品、矿泉水、单晶糖、饮料、辣椒粒、牛奶（需用胰蛋白酶处理）中菌落计数的检验。2引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准必威体育精装版版本的可能性。SN0330—1994出口食品中微生物学检验通则3抽样按SN0330规定执行。4检验方法4.1方法原理将滤膜放入滤器，过滤样品，使细菌留在膜表面。将滤膜放在胰化大豆-坚牢绿琼脂（TSFA)培养基上培养，产生深、浅绿色菌落，进行计数。4.2设备和材料4.2.1滤器：一套，备有预滤器。4.2.2真空泵。4.2.3滤膜：有机或水相，孔径为0.45μm。4.2.4培养箱：36℃土1℃。4.2.5水浴箱：35℃±1℃。吸管：1mL、10mL，具刻度。4.2.6玻璃三角瓶和广口瓶：200mL，500mL。4.2.7试管：17mm×170mm，玻璃制。. 9玻璃珠：直径5mm。平皿：直径90mm。.11天平：感量0.1g。4.2.12均质器。4.3培养基和试剂4.3.1蛋白陈-吐温80(PT)稀释液（见附录AA1)。2002-06-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2002-01-16批准1 SN/T1059.3--20024.3.2胰化大豆-坚牢绿琼脂(TSFA)见附录AA2)。4.3.3三（羟甲基）胺甲烷Tris缓冲剂（见附录AA3）。4.3.4胰蛋白酶贮存液（见附录AA4）。4.4样品制备4.4.1以无菌操作取有代表性的样品盛于灭菌容器内。如有包装，则用75%乙醇在包装开口处擦拭后取样。4.4.2样品匀液制备固体或半固体食品：以无菌操作取25g样品，放人装有225mLPT稀释液的灭菌均质杯内，于8000r/min，均质1min～2min，制成1：10的样品匀液。如样品均质时间超过2min，应在均质杯外加冰水冷却。干燥或干粉食品：以无菌操作取25g样品，放入装有225mLPT稀释液的500mL灭菌广口瓶中（瓶内预置适当数量的玻璃珠）。迅速振摇，将样品混匀，制成1：10的样品匀液。振摇时，幅度30cm，7s内振摇25次，也可用机械振荡器振荡15s代替手摇。液体食品：用灭菌吸管吸取25mL样品，放入装有225mLPT稀释液的500mL的灭菌广口瓶中，按条中所述的方法，迅速振摇，制成1：10的样品匀液。吸取样品时，吸管插入液面下不要超过2.5cm。吸管内液体要在2s～4s内完全排入稀释液中。不要在稀释液中吹洗吸管。4.4.3稀释样品匀液用10mL灭菌吸管准确吸取1：10的样品匀液10mL放人装有90mLPT稀释液的200mL灭菌广口瓶中。按中所述的方法，迅速振摇