SN 0930-2000进出口花粉中全氨基酸测定方法 氨基酸自动分析仪法.pdf

SN中华人民共和国出人境检验检疫行业标准SN/T 0930—-2000进出口花粉中全氨基酸的测定方法氨基酸自动分析仪法Method for the determination of totalamino acid in pollen for import and export--Amino acid automatic analyzer method2000-06-22 发布2000-11-01实施中华人民共和国国家出人境检验检疫局‧发 布 SN/T 0930--2000前言本标准是对原专业标准ZBX83002一87《出口花粉中全氨基酸的测定方法（氨基酸自动分析仪法)》的修订。本标准与原标准比较，无技术路线的改变，仅在标准格式上按照GB/T 1.1一1993《标准化工作导则第1单元：标准的起草与表述规则第1部分：标准编写的基本规定》的要求进行修订的。本标准从实施之日起，同时代替ZBX83002-—1987。本标准由中华人民共和国国家出入境检验检疫局提出并归口。本标准由中华人民共和国上海出入境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人：倪昕路。 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准进出口花粉中全氨基酸的测定方法SN/T 0930—2000氨基酸自动分析仪法代替 ZB X83 002--1987Method for the determination of totalamino acid in pollen for import and export --Amino acid automatic analyzer method1 范围本标准规定了用氨基酸自动分析仪测定进出口花粉中全氮基酸含量的方法。本标准适用于进出口花粉中全氨基酸含量的测定。其中有天门冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、半胱氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、组氨酸、精氨酸等十七种氨基酸。2测定方法2.1方法原理样品中蛋白质经盐酸水解成氨基酸，再用氨基酸自动分析仪测定，外标法定量。氮基酸自动分析仪采用离子交换树脂吸附氨基酸，以不同pH值的缓冲液分阶段洗脱，洗脱出的氨基酸与三酮溶液呈显色反应，由分光光度法测定其含量，脯氨酸测定波长为440 nm，其余均为570 nm.2.2 试剂所用试剂均为分析纯以上，水为去离子水或蒸馏水。2.2.1 盐酸溶液:6 mol/L,0.02 mol/L 水溶液。2.2.2氮基酸标准溶液：内含18种组分,即17种氨氮基酸和氨。2.2.3各种pH值缓冲液。2.2.4节三酮溶液。注：上述2.2.2条至2.2.4条试剂按仪器说明书配制。2.3仪器与设备2.3.1氮基酸自动分析仪。2.3.2粉碎机或瓷研钵。2.3.3标准筛：60日。2.3.4水解管：玻璃，150 mmX12mm(i.d.）,底部呈球形,容积约2mL。2.3.5充氮抽真空装置：真空泵或抽气管、高纯氮纯度为99.999%。2.3.6分析天平：精度为0.0001g。2.3.7电热恒温箱：恒温（110士2)℃。2.3.8 沸水浴。2.4测定步骤中华人民共和国国家出人境检验检疫局2000-06-22批准2000-11-01 实施1 SN/T 0930—20002.4.1样品制备取10～100g原始样品。先粗粉碎，混匀后用四分法从中缩分出约5g试样,细磨,研磨温度不可过高，使其颗粒全部通过60目筛孔。2.4.2样品处理称取适量的上述试样（使其含粗蛋白质约3mg），放入水解管中，加入2ml 6 mol/L盐酸，抽真空后充氮气，如此重复三次，最后→次抽真空后用煤气灯封口。置于110℃下水解24h。将水解管打开，把全部样品转移至玻璃蒸发血中，在水浴上加热至干后加适量水，重复三次，将盐酸全部赶走，然后用0.02mol/L盐酸溶解样品，过滤并稀释到一定体积,使其氮基酸含量符合仪器所规定的范围，供测定使用。2.4.3测定根据氨基酸自动分析仪说明书设定的分析条件依次测定氨基酸标准溶液和样品溶液。2.5 结果计算和表述若仪器带有微处理装置，按说明书设定计算程序，进行样品中各氨基酸含量的计算，或按下列各公式计算。2.5.1样品中各氨基酸的百分含量按式(1)计算：A..S, .V..VX=× 10-41s..V..m-样品中某氨基酸的含量，%；式中:X—Aa标样中某氨基酸的浓度,ng/μL;S;一一样品中某氨基酸的峰面积,mm;V—标样进样量,μLV-一样品稀释总体积,mL;-标样中某氨基酸的峰面积,mm;S.V;—样品进样量，uL;一样品质量，g。M2.5.2样品内100g粗蛋白质中各氮基酸毫克数按式(2)计算：g×10X,=(2)式中：X,—样品中每100g 粗蛋白质中某氨基酸含量,mg/100g;C;一样品中某氨基酸的含量,%;-样品中粗蛋白质含量，%。D一2.