饲料添加剂淫羊藿提取物中黄酮醇苷的测定 高效液相色谱法.pdf

ICS 65.120 CCS B 46 中华人民共和国国家标准 GB/T ××××—×××× 饲料添加剂淫羊藿提取物中黄酮醇苷的测 定 高效液相色谱法 Determination of flavonol glycosides in epimedium extract as feed additive—High performance liquid chromatography （公开征求意见稿） 在提交反馈意见时，请将您知道的相关专利连同支持性文件一并附上 ××××- ××-××发布 ××××- ××-××实施 国家市场监督管理总局 发 布 国家标准化管理委员会 发布 GB/T XXXX－XXXX 饲料添加剂淫羊藿提取物中黄酮醇苷的测定 高效液相色谱法 1 范围 本文件描述了饲料添加剂淫羊藿提取物中黄酮醇苷的高效液相色谱测定方法。 本文件适用于饲料添加剂淫羊藿提取物中淫羊藿苷、朝藿定A 、朝藿定B 、朝藿定C 和宝藿苷 I 的测定。 本文件的定量限为0.2 g/kg 。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用 文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单） 适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 20195 动物饲料 试样的制备 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 原理 试样中的黄酮醇苷用甲醇溶液提取，高效液相色谱仪测定，外标法定量。 5 试剂或材料 除非另有规定，仅使用分析纯试剂。 5.1 水：GB/T 6682，一级。 5.2 甲醇：色谱纯。 5.3 乙腈：色谱纯。 5.4 70% 甲醇溶液：量取700 mL 甲醇（5.2 ）于1 000 mL 容量瓶中，加水定容，混匀。 5.5 混合标准储备溶液 （2 mg/mL ）：准确称取淫羊藿苷（纯度≥96% ）、朝藿定A （纯度≥95% ）、 朝藿定B （纯度≥95% ）、朝藿定C （纯度≥95% ）、宝藿苷I （纯度≥95% ）各20 mg （精确至0.01 mg ），置于10 mL 棕色容量瓶中，用甲醇（5.2 ）溶解并定容，混匀。－18 ℃以下避光保存，有效期 3 个月。5 种黄酮醇苷的CAS 号、分子式、相对分子质量和结构式见附录A 。 5.6 混合标准系列溶液：准确移取适量混合标准储备溶液（5.5 ）于10 mL 棕色容量瓶中，用70% 甲 醇溶液（5.4 ）定容，混匀，配制成浓度为0.5 mg/L、5 mg/L、10 mg/L、20 mg/L 、50 mg/L、100 mg/L 和200 mg/L 混合标准系列溶液。临用现配。 5.7 微孔滤膜：0.45 μm ，有机系。 2 GB/T XXXX－XXXX 6 仪器设备 6.1 高效液相色谱仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器。 6.2 分析天平：精度0.1 mg 和0.01 mg 。 6.3 超声波清洗机：功率不低于250 W 。 6.4 离心机：转速不低于4 000 r/min 。 6.5 涡旋混匀器。 7 样品 按GB/T 20195 制备试样，至少200 g ，粉碎使其全部通过