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基于Meta分析解析羊肠道细菌优势菌群
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王 彤,刘 倩,严 慧,纪守坤,刘 萱,朱美玉,王亚越,刘月琴,张英杰
(河北农业大学动物科技学院,河北保定 071000)
肠道微生物在刺激新生反刍动物肠道免疫系统建立[1]、参与宿主免疫调节方面发挥重要作用[2],在动物后肠段营养物质降解利用方面也具有重大意义,羊盲肠微生物发酵产生的挥发性脂肪酸占总产量的12%[3]。细菌作为肠道菌数量最大的一类,其多样性极高,目前已分离鉴定的细菌包括53 个门、26 024 个种[4],肠道细菌群落受饲料[5-6]、饲养方式[7]、季节[8]和遗传[9]等多因素影响,不同研究中所获得的群落多样性各异,导致研究者对羊肠道微生物群落结构的认知产生争议。Smith 等[10]研究发现,优势物种在维护生物群落稳态方面发挥重要作用,动物胃肠道内的优势菌往往会决定动物机体的采食[11]和免疫[12]等功能,也更容易在肠道中定植生存。因此,肠道中的优势菌群可能也在维护肠道微生态平衡中发挥重要作用,对羊肠道优势菌群进行研究对其肠道微生态调控具有重要意义。
Chang 等[13]研究发现,羊肠道菌以密螺旋体属(Treponema)为绝对优势属,其次有琥珀酸弧菌属(Succinivibrio)和5-7N15。Zhang 等[14]研究发现,小尾寒羊肠道以拟杆菌属(Bacteroides)、瘤胃球菌属(Rumi nococcus)、乳杆菌属(Lactobacillus)、梭菌属(Clostri dium)和黄杆菌属(Flavonifractor)为主。研究结果的差异可能与动物个体差异及样本过少等因素有关,羊肠道具有普适参考性的优势菌类型及其丰度区间仍不明确。
Meta 分析能够有效综合同一研究内容的不同独立研究结果,利用系统定量的统计方法,对已发表文献中的同类数据进行合并分析,获得全面性的结论,已形成一套严谨的流程,在医学、生态学等领域广泛应用。因此,本研究采用网状文献检索和Meta 分析法结合,通过对大量文献的丰富数据进行统计,得到羊肠道优势菌群的有效丰度区间,从而达成系统性的评价和描述羊肠道优势菌群及其丰度区间的目的,为羊肠道常驻优势菌的研究提供有力的证据和合理的参考。
1 材料与方法
1.1 文献检索与筛选标准 研究对象为健康羊的优势菌群种类和丰度。采用中国期刊全文数据库(CNKI)和Web of Science 2 个平台,并通过追查已纳入文献的Reference进行检索。检索时间区间为建库到2021 年3 月5 日。在中国知网等中文数据库中,以主题词“羊”、“肠道”、“菌群结构”、“菌群”、“微生物”、“消化道”和“肠道细菌”进行检索。在Web of Science 外文数据库中,以主题词“sheep”、“Goat”、“Lamb”、“Bacterial Community”、“Intestinal Tract”、“Intestinal Flora”和“Microbiota”进行检索。
1.2 文献纳入与排除标准 纳入指标:①英文和中文文献;②结局指标:菌群种类、数量、丰富度与多样性;③试验动物为断奶后的羊。排除标准为:①只能获取Summary且无法与作者获得联系的文献;②研究对象不符合的特殊样本(哺乳期羔羊;瘤胃菌群;小肠菌群);③数据不全的文献(结果和附表中只有图或文字表述,未给出门或者属的具体丰度信息;未给出SD、SE 或SEM值);④未公开发表,重复报道或信息不完整的文献;⑤综述、个案报道或基础研究等类型的相关文献。
1.3 资料提取 由研究者进行资料的提取并反复核对,信息提取由研究特征、研究对象的特征和结局指标3 部分组成,包括作者、发表时间、实验方法、研究对象类别、样本量、试验组、对照组、微生物丰度、标准误等。
1.4 统计分析 采用R-4.0.0 软件进行方差倒数法Meta分析,合并效应量为微生物丰度,计算合并之后的点估计值及95%的可信区间(CI)。若原始数据只提供中位数、标准差SD 及样本量N,通过公式计算标准误SE。利用I2和P 进行综合判断是否存在统计学异质性,P>0.1,I2<50%,表示存在同质性或异质性很小,采用固定效应模型;P<0.1,I2>50%,表示存在较大异质性,采用随机效应模型。使用R-4.0.0 软件绘制漏斗图评价发表偏倚,Thompson 算法计算偏倚显著性,P<0.05,不对称漏斗形表明可能存在发表偏倚;P>0.05,对称的漏斗形则表示不存在发表偏倚。
2 结果与分析
2.1 文献检索和筛选 本研究经过初步检索共获得相关文献1 413 篇,在简单阅读Summary后剔除重复文献和不符合要求的文献640 篇,通过阅读文章内容,排除602 篇(包括文献综述43 篇,观察性实验108 篇,菌种致病研究
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