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;主要内容;（一）污染
指在组织培养过程中培养基和培养材料滋生杂菌，导致培养失败的现象。;（二）常见的污染种类
1. 细菌性污染
特征：菌斑呈黏液状物，１~２ｄ可现。;（二）常见的污染种类
2. 真菌性污染：
特征：培养基或外植体表面出现白、黑、绿等色的块状菌丝（孢子）。接种后３~５天内发生。;１. 外植体带菌
２. 培养基及各种所用器具灭菌不彻底
３. 工作人员未严格按照无菌操作规程操作
４. 周围环境不清洁
５. 超净工作台的过滤装置失效;（一）预防外植体带菌的措施
1. 预培养
2. 选取污染少易启动的外植体
3. 多次灭菌法
4. 多种药液交替浸泡法;（二）培养基及各种使用器具灭菌要彻底
1. 高压蒸汽灭菌锅的使用必须做到：
（1）排尽空气
（2）准确把握时间与温度 121 ~123℃，15~30min，可酌情延长灭菌时间
2. 干热空气灭菌法
160 ℃ ~180℃ 1-3h
3. 火焰灭菌法 酒精灯外焰;（三）工作人员必须严格按照无菌操作规程操作
（四）定期清理与消毒缓冲室、接种室、培养室
（五）定期检修超净工作台;;主要内容;一、玻璃化
（一）玻璃化现象;一、玻璃化
（一）玻璃化现象;一、玻璃化
（一）玻璃化现象;一、玻璃化
（一）玻璃化现象;一、玻璃化
（二）造成玻璃化的因素;一、玻璃化
（二）造成玻璃化的因素;一、玻璃化
（三）克服玻璃化的措施;一、玻璃化
（三）克服玻璃化的措施;二、褐变（褐化）
（一）褐变现象;二、褐变（褐化）
（一）褐变现象;二、褐变（褐化）
（二）引起褐变的因素;二、褐变（褐化）
（二）引起褐变的因素;二、褐变（褐化）
（三）防止褐变的措施;二、褐变（褐化）
（三）防止褐变的措施;二、褐变（褐化）
（三）防止褐变的措施
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