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按原理分类; 平板色谱法;第一节 薄层色谱法; [原理]: 当展开剂从薄板上固定相的空隙中通过时, 由于各组分的K的不同和足够多次的分配.;装置;1.层析缸 2.滤纸 3.原点 4.展开剂 5.前沿 6.7.斑点;[缺点］： Rf值的重复性差 分离效率较低，不适用挥发性试样分离。 定性定量不便。;x; Rf的大小取决于溶质在二相间的分配系数 及滤纸的性质. 不同的组分具有不同的分配系数, 因而也就有不同的Rf. 这就是定性的依据.;(1). 欲分离物的本性: 物质在两相的分配系数,决定了它的Rf大小;;(2). 层析溶剂:同一组分在不同溶剂中Rf不同。通常应选这样的层析剂，使溶质Rf适宜范围0.2-0.8，最佳范围0.3-0.5。不同组分的Rf差值0.05. ;(5). 温度:在层析缸中用红外灯照射。温度会影响溶质的分配系数及流动相的扩散速度。层析操作应在恒温下进行，温度不超过± 0.5oC;吸附剂 　决定吸附性能的因素：吸附剂的化学组成、活性、表面积;(1). 氧化铝 　　　氧化铝呈微弱碱性，酸性较强的化合物在氧化铝上吸附的很牢（所以，酸性物质分离不好），故通常用于分离碳氢化合物、生物碱类和对碱性物质比较稳定的中性物质、碱性物质。;;　　 ？ 由于脱水过程受到许多因素的影响，因此，每批生产的Al2O3 ，其表面积和表面孔穴结构并不一致，活性也不相同。;;市售的供薄层色谱用的Al2O3有: Al2O3 －H　氧化铝中无粘合剂 Al2O3 －G　氧化铝中含煅石膏（一般5％煅石膏）［煅石膏CaSO4，作为粘合剂］　 Al2O3 －HF254　氧化铝中不含煅石膏，仅含荧光指示剂（在254 nm下呈黄绿色荧光） Al2O3 －GF254　氧化铝中既含煅石膏又含荧光指示剂（在254 nm下呈黄绿色荧光） 上述商品可以直接调料涂敷（1份料，2份水调合）;（２）．硅胶（吸附性较Al2O3弱）; 硅胶是薄层色谱固定相中用得最多的一种 硅胶为多孔性无定形粉末，表面带有硅醇基呈弱酸性，通过硅醇基(吸附中心)与极性基团形成氢键而表现其吸附性能，由于各组分的极性基团与硅醇基形成氢键的能力不同，组分被分离。 硅胶吸附水分形成水合硅醇基而失去吸附能力，但将硅胶加热至100℃左右，该水能可逆被除去，而提高活度，这一过程称为“活化”。;硅胶的结构为:;　　？硅胶活性的测定：称取二甲黄、苏丹红、靛酚蓝各40mg溶于100 mL 苯中，将此混合液滴加于薄层上，用石油醚展开10 cm，混合物应不动；如用苯展开，则应分成三个斑点，其Rf值分别为：二甲黄0.58，苏丹红0.19，靛酚蓝0.08（展层时间30 ~ 45 min），则认为此硅胶合格。经本法测定的活性与Al2O3活性Ⅱ ~ Ⅲ级相当。;　　薄层用商品硅胶有：硅胶H（不含粘结剂）、硅胶G（含粘结剂煅石膏CaSO4 ）、硅胶HF254（含荧光物质的硅胶）硅胶GF254（含有煅石膏CaSO4和荧光剂）;(3). 选择吸附剂的规律： ;展开剂（流动相）; （1）常用展开剂的极性： 石油醚环己烷二硫化碳四氯化碳三氯乙烯苯甲苯二氯甲烷氯仿乙醚乙酸乙酯丙酮乙醇甲醇吡啶酸水;?（2）欲分离组分的极性： 饱和碳氢化合物系非极性化合物，不被吸附或吸附不牢。在其结构中引进某些功能团则极性增加。取代基团极性越强，整个分子极性越强。常见功能团按其极性增加的顺序是： 烷烃烯烃醚类硝基化合物二甲胺酯类酮类醛类硫醇胺类酰胺醇类酚类羧酸类 ;当有机分子的基本母核相同时，极性基团越多，整个分子的极性越大 分子的双键越多，吸附能力越强；共轭双键越多，吸附能力越强 分子中取代基团的空间排列对吸附性也有影响，如同一母核中羟基处于能形成内氢键位置时，其吸附能力弱于不能形成内氢键的化合物;（3）展开剂的选择;4 操作技术;（1）制板;涂布液 取一定量的吸附剂放入研钵中，加入需要的水或适当的溶剂，研磨时间以调成稀糊状为度，当浓度均一后，即成胶状物，色泽洁白为最佳，立即倾入玻璃板上，用下述方法涂布。 涂布方法 玻棒涂布：;玻片刮涂 倾斜涂布（利用流平性）-简，但均匀性差 涂布器;(2)点样 　　适当的点样量，集中的斑点是得到一个好的色谱的必要条件。如何才适当？不同的分离要求、不同的薄板（有厚有薄）、不同的吸附剂（性能不一），需要不同的点样量。从下图可见：点样量少了，不易检出；点样量多了，易拖尾或扩散，影响分离效果。;0.1;　　纯物质的鉴定，若又有