定量PCR基本原理及方法课件.ppt

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2023-08-23 发布于四川
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定量PCR基本原理及方法 a 荧光定量PCR基本原理b 荧光定量PCR标记方法 ? 定量PCR技术的产生1992年由Higuchi等人第一次报告：使用EB加入PCR反应体系，经改装的带有冷CCD的PCR仪检测样品的荧光强度 nY：扩增物数量； X ：起始模板数量；Ev：扩增效率；n：扩增循环数前提：在最佳实验、相同Ev以、扩增产物量相同原理：反应物中原始分子数（X）与其所需要的扩增循环次数（n）成反比，由此计算出标本中靶分子的准确含量，即：LgX=LgY–n×Lg(1+Ev)=b - n×a (a、b为常数) ün: 扩增循环数的确定阈值：PCR扩增信号进入相对稳PCR循环在到达Ct值所在的循

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