第十单元 第1课时　基因工程的基本工具和基本操作程序.pptx

第1课时;;;;;;2.DNA重组技术的基本工具 (1)限制性核酸内切酶(也称“限制酶”) 原核生物 特定核苷酸序列;(2)DNA连接酶;(3)载体;;;;;突破 强化关键能力 考向一 限制酶和DNA连接酶 下表为常用的限制性核酸内切酶(限制酶)及其识别序列和切割位点，由此推断以下说法中，错误的是;Hind Ⅱ、Sma Ⅰ两种限制酶切割后形成平末端 Sau3A Ⅰ限制酶的切割位点在识别序列的外部 BamH Ⅰ和Sau3A Ⅰ两种限制酶切割后形成相同的黏性末端 √D.一种限制酶一定只能识别一种核苷酸序列;Hind Ⅱ、Sma Ⅰ两种限制酶沿着中轴线切口切开，切割后形成平末端，A项正确； Sau3A Ⅰ限制酶识别GATC序列，切割位点在识别序列的外部，B项正确；;2.(2023·河北沧州高三模拟)限制酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶，下列说法正确的是;DNA连接酶连接的是两个DNA片段，A错误； 限制酶只能切割双链DNA片段而不能切割RNA，烟草花叶病毒的核酸为RNA，B正确； 大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成，C错误； 限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，但是因为原核生物DNA分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰，所以限制酶不能剪切自身的DNA，D错误。;考向二 基因工程载体的应用;病毒中不含质粒，A错误； 细菌基因主要存在于拟核DNA上，也有少数存在于质粒上，B错误；质粒为小型环状DNA分子 ，存在于细胞核外或拟核外的细胞质基质中，C正确； 质粒是基因工程中的重要工具之一，但不是工具酶，D错误。;4.下列有关基因工程中载体的说法，正确的是;在进行基因工程操作中，被用作载体的质粒是在天然质粒的基础上进行过人工改造的，A错误； 具有一至多个限制酶切点、具有标记基因的质粒才可以作为基因工程中的载体，B错误； 质粒是一种独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外的环状 DNA分子，C错误； 作为载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA进行鉴定和选择的标记基因，而且能在受体细胞中复制并稳定保存，D正确。;;;;;归纳总结;;;;;;;易错提醒;;;(3)构建过程;;3.将目的基因导入受体细胞;;;;4.目的基因的检测与鉴定;考向一 目的基因的获取 5.如图表示基因工程中获取目的基因的示意图，下列相关叙??不正确的是 A.③表示PCR技术，用来扩增目 的基因 √B.若获取的目的基因相同，则图 中基因组文库小于cDNA文库 C.要从基因文库中得到所需的目的基因可以根据目的基因的相关信息来获取 D.若基因比较小，核苷酸序列又已知，可以通过化学方法直接人工合成获取;cDNA文库只包括某种生物的部分基因，而基因组文库包括某种生物的全部基因，因此cDNA文库小于基因组文库，B错误。;6.(2023·辽宁盘锦高三检测)下列有关体内DNA复制和体外PCR扩增的叙述，错误的是;体内DNA复制和体外PCR扩增过程中都需要氢键打开，体内DNA复制需要解旋酶打开氢键，而PCR技术需要高温解旋，C正确； 体外PCR扩增时需要热稳定DNA聚合酶，体内DNA复制需要DNA聚合酶，D错误。;考向二 基因工程的基本操作程序 7.戊型肝炎病毒是一种RNA病毒，ORF2基因编码的结构蛋白(pORF2)位 于病毒表面，构成病毒的衣壳。我国科研人员利用基因工程技术，在大肠杆菌中表达pORF2，制备戊型肝炎疫苗，过程如图。下列关于该疫苗的叙述，正确的是;过程①需要的酶是RNA聚合酶，原料是A、U、G、C 重组基因表达载体上的启动子需来源于戊型肝炎病毒 过程⑤需要用聚乙二醇处理大肠杆菌使其处于一种能吸收周围环境中 DNA分子的生理状态 √D.过程⑥大量制备pORF2蛋白前应做相应的检测与鉴定;戊型肝炎病毒是一种RNA病毒，过程①是以病毒RNA为模板合成DNA，获取目的基因的过程，需要的酶是逆转 录酶，原料是四种脱氧核苷酸，A项错误； 启动子是一段有特殊结构的DNA片段，其作用是供RNA聚合酶的识 别结合以驱动目的基因的转录，启动子具有物种或组织特异性，构建在大肠杆菌细胞内特异表达pORF2蛋白的载体时，需要选择大肠 杆菌细胞的启动子，而不能选择其他物种和组织细胞的启动子，B项错误；;将目的基因导入微生物细胞的方法是Ca2＋处理法，需要用Ca2＋处理大肠杆菌，增大大肠杆菌细胞壁的透过性，使其处于一种能吸收周 围环境中DNA分子的生理状态，C项错误。;8.某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamH Ⅰ三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示。请回答下列问题：;结合前面的分析，根据农杆菌转化法的原理，该方法中应用的质粒必须是具有可转移的T－DNA的Ti质 粒。该方法中农杆菌的作用是感染烟草细胞，进而把目的基因