发酵工程制药—核酸类药物的发酵制药.pptx

生物制药工艺课程 肌苷的发酵制药 洋地黄肌苷的背景知识肌苷是由次黄嘌呤与核糖结合而成。次黄嘌呤可由腺嘌呤(A)脱氨形成，是嘌呤衍生物。 1、肌苷生产的工艺流程 精制菌种菌种扩大培养发酵提取吸附洗脱肌苷控制要点2、肌苷生产的控制要点 (1) 菌种变异芽孢杆菌 (2) 种子扩大培养流程2、肌苷生产的控制要点 A、斜面培养30-32℃, 培养48h斜面培养基：葡萄糖、蛋白胨、酵母浸膏、牛肉浸膏、琼脂B、摇瓶振荡培养(32 ±1)℃,培养18h摇瓶培养基：葡萄糖、蛋白胨、酵母浸膏、玉米浆、尿素、NaClC、种子罐培养 (32 ±1)℃，培养12-15h种子罐培养基：同摇瓶种子培养基 (3) 发酵 50L发酵罐， (32 ±1)℃, 93h 500L发酵罐, (32 ±1)℃, 75h 20000L发酵罐，(35 ±1)℃, 83h发酵培养基：淀粉水解糖、干酵母水解液、豆饼水解液、尿素、硫酸铵、硫酸镁、氯化钾、磷酸氢二钠、有机硅油 3溶解氧和CO2的影响1温度的影响4泡沫的影响2pH的影响发酵过程要注意 (4) 提取、吸附、洗脱(5) 精制 生物制药工艺课程 ATP的发酵制药 2023/9/613 三磷酸腺苷是体内广泛存在的辅酶，是体内组织细胞所需能量的主要来源，蛋白质、脂肪、糖和核苷酸的合成都需ATP参与。ATP经腺苷酸环化酶催化形成环磷酸腺苷(cAMP)，是细胞内的生物活性物质，对细胞许多代谢过程有重要的调节作用。 ATP为蛋白质、糖原、卵磷脂、尿素等的合成提供能量，促使肝细胞修复和再生，增强肝细胞代谢活性，对治疗肝病有较大针对性。但外源性ATP不易进入细胞，且与体内需要的量比较，可能提供的量微不足道。 三磷酸腺苷 白色类白色粉末，易溶于水，难溶于有机溶剂。在水中的溶解度具有氢型＞钠盐＞钡盐＞汞盐的顺序。在碱性溶液(pHl0)及低温下比较稳定。 ATP二钠是两性化合物。能与可溶性汞盐和钡盐形成不溶于水的沉淀物，利用这种性质可分离ATP。 1、化学结构和性质 2、生产方法 从兔肌肉原材料中直接提取法 微生物发酵法 2023/9/615 三磷酸腺苷生产工艺 3、产氨短杆菌直接发酵法 2023/9/616 ①菌种培养 培养基组成葡萄糖10％，硫酸镁1％，尿素0.3％，玉米浆适量，磷酸氢二钾1％，磷酸二氢钾1％pH7.2，接种量7—9％，pH控制在6.8—7.2。 ②发酵培养 培养温度30℃，36h，投入腺嘌呤，加尿素、氢氧化钠和氨，控制pH。通风量1：0.5v／(v·min)。 ③提取、精制 发酵液加热使酶失活后，调节pH3—3.5，过滤，分离除去菌体，上清液通过769活性炭柱吸附，用氨醇溶液洗脱，洗脱液再用CL-型阴离子交换树脂吸附ATP，经氯化钠—盐酸液洗脱．洗脱液经醇沉，过滤，丙酮洗涤，脱水，置五氧化二磷真空干燥器中干燥，得ATP品。 产氨短杆菌B1是生物素缺陷型菌株，其诱变菌株也依赖生物素作为生长因子。玉米浆中含有丰富的生物素，加入培养基中使ATP的产量显著提高。 4、注意事项