《丛枝菌根真菌黑土田间接种技术规程》（DB23T 3572-2023）.pdfVIP

ICS 65.020.20 CCS B 05 DB23 黑 龙 江 省 地 方 标 准 DB23/T 3572—2023 丛枝菌根真菌黑土田间接种技术规程 2023-08-28 发布 2023-09-27 实施 黑龙江省市场监督管理局 发 布 DB23/T 3572—2023 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020 《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由黑龙江省农业农村厅提出。 本文件起草单位：黑龙江省黑土保护利用研究院、哈尔滨芮煊科技有限公司、黑龙江国宏节能环保 有限公司、黑龙江省农业环境与耕地保护站、黑龙江省农业科学院和黑龙江省知识产权保护中心。 本文件主要起草人：王爽、孙磊、赵文博、刘建生、马云桥、刘国辉，刘媛媛，金品娇、章圣龙、 王伟、高中超、李伟群、姜举娟、王康康。 I DB23/T 3572—2023 丛枝菌根真菌黑土田间接种技术规程 1 范围 本文件规定了丛枝菌根真菌的获取、丛枝菌根真菌菌剂的制备、菌剂黑土田间接种和生产档案。 本文件适用于丛枝菌根真菌黑土田间接种。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB 20287 农用微生物菌剂 NY/T 1121.1 土壤检测 第1部分：土壤样品的采集、处理和贮存 NY/T 1536 微生物肥料田间试验技术规程及肥效评价指南 3 术语和定义 本文件没有界定的术语和定义。 4 丛枝菌根真菌的获取 4.1 第三方获取 应在经认证的丛枝菌根真菌种质资源库或保藏中心获取。 4.2 自行分离 4.2.1 野外样品采集与处理 应在秋季收获前采样，用经酒精消毒后的采样工具沿宿主植物周围将完整根系挖出，根系及携带土 壤放入无菌袋中；根围土壤采集方法按照 NY/T 1121.1 的规定执行。 4.2.2 丛枝菌根真菌菌种的分离与保存 土壤中 AM 真菌孢子的分离提取采用湿筛倾析法。将采集的土壤样品混匀，称取 100 g 放入容器中， 清水浸泡 20 min ~ 30 min；用孔径 500 μm ~ 38μm 洁净的土壤筛分层重叠放置，小孔径在最底层， 并使筛面适当倾斜；用玻璃棒搅拌土壤浸泡液，停放后待大的石砾或杂物沉积在容器底部，将上层的土 壤悬浮液缓慢倒入最上一层的土壤筛内，以集中在一小范围内倾倒为宜；用清水继续冲洗各筛面的筛出 物，直至无土壤微粒为止；用清洁的洗瓶分别将各筛面上之后的筛出物轻轻地洗入洁净的培养皿内，在 体式显微镜下用吸管分别将相同形态的孢子逐个移入小玻璃瓶内，或放在滤纸上。 2 DB23/T 3572—2023 在体视显微镜下，将湿筛分离出的外表健康的孢子转移至盛无菌蒸馏水的表面皿中，去除所有菌丝 和碎屑后于 4 ℃至少存放48 h，检查以挑出变色、有斑、过度透明或表面长菌的异常孢子。换水后， 再将孢子贮存于 4 ℃下 24