仪器分析答案—详尽版_大学生物_考试复习_必备_高分.docx .pdf

仪器分析答案整理 一、 色谱理论 试样中各组分在两相间不断进行分配而使混合物中各种组分分离的方法，称为色谱法。 ♦固定在玻璃管内的填充物（固体或液体），称为固定相。 ♦携带试样混合物流过固定相的流体（气体或液体），称为流动相。 二、 液相色谱 1、 亲水性固定液常采用疏水性流动相，即流动相的极性小于固定相的极性，称为正相。 固定相为极性，流动相为非极性的色谱体系，称为正相分配色谱。装填极性正向柱的色谱柱为正相柱，使 用非极性 流动液的称为正相流动液。 适合极性化合物的分离，极性小的组分先流出，极性大的组分后流出。 2 、 若流动相的极性大于固定液的极性，则称为反相液液色谱，非极性柱也称为反相柱。 适合于非极性化合物的分离，极性大的组分先流出，极性小的组分后流出。P120 ★ 试题：正相色谱柱和反向色谱柱是如何界定的，各适合哪类物质的分离？（问答题） 答：根据固定相和流动相的极性来判定的。固定相为极性，流动相为非极性的色谱体系，称为正相分配色 谱（色谱 柱称正相色谱柱）。适合极性化合物的分离，极性小的组分先流出，极性大的组分后流出；反之流 动相的极性大于 固定液的极性，则称为反相分配色谱（色谱柱称反相色谱柱），适合于非极性化合物的分离, 极性大的组分先流 出，极性小的组分后流出。P141 采用正相液-液分配分离时，首先选择中等极性溶剂，若组分的保留时间太短，降低溶剂 极性，反之增加。也可在 低极性溶剂中，逐渐增加其中的极性溶剂，使保留时间缩短。 ★ 试题：不同极性物质，在正相，反相色谱中流出的顺序 （选择题）P141 常用溶剂的极性顺序： 水（最大）＞ 甲酰胺〉乙腊〉甲醇〉乙醇〉丙醇〉丙酮〉二氧六环〉四氢吠喃〉甲乙酮〉正丁醇〉乙酸乙 酯〉乙 醍〉异丙醍〉二氯甲烷〉氯仿〉漠乙烷＞苯＞四氯化碳〉二硫化碳〉环己烷〉己烷〉煤油 （最小） ★试题：色谱柱分离度的影响因素 （选择题） 分离度的表达式： 分离度 R ：定量描述混合物中相邻两组分的实际分离程度。 阮+吼 氏=0.8 ：两峰的分离程度可达 89%； R=l：分离程度 98% ； 一 2 （，R2 ， R=1.5 ：达 99.7% （相邻两峰完全分离的标 1.699 ［匕/2 （2 ）+ 匕 /2 （1）］ 分离度基本关系式： 1 fa-Ti f k 一影响因素： r R =彳、血「= •■:在］; 保留值之差——色谱过程的热力学因素：色谱峰间的距离。 区域宽度一一色谱过程的动力学因素：色谱峰的宽度，由色谱柱性能 1+fr « =（丁）七有效 决定。 a ★ 试题 ：计算题 P14L13 、14 1. 基线：无试样通过检测器时，检测到的信号即 为基线。 2. 保留值: （1） 时间表示的保留值 保留时间（益）：组分从进样到柱后出现浓度 极大 值时所需的时间； 死时间 ， ）：不与固定相作用的气体（如空气） （ M 的保留时间；