临床免疫学检验第五版课后题重点(可打印修改) .pdfVIP

第四章 1. 杂交瘤技术原理：以聚乙二醇（PEG ）为细胞融合剂，使免疫后能产生抗体的小鼠脾细胞与能在体外长期繁殖的小 鼠骨髓瘤细胞融合产生杂交瘤细胞，通过次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶核苷 （HAT ）选择性培养基的作用，只让 融合成功的杂交瘤细胞生长，经反复的免疫学检测筛选和单个细胞培养（克隆化），最终获得机能产生所需单克隆抗 体又能长期体外繁殖的杂交瘤细胞系。将这种细胞扩大培养，接种于小鼠腹腔，可从小鼠腹水中得到高效价的单克隆 抗体。 2.细胞株冻融的原则：快冻慢融。目前均采用液氮保存杂交瘤细胞。细胞放入液氮前需要逐步降温，如果冻存管放置 于-80 摄氏度低温冰箱过夜后再放入液氮中，可长期保存。复苏细胞时，冻存管取出后，立即 37 摄氏度水浴，使之融 化。 第五章 1.凝集反应：是指细菌和红细胞或红细胞等颗粒性抗原或表面包被可溶性抗原（或抗体）的颗粒性载体与相应抗体 （或抗原）特异性结合后，在适当电解质存在下，出现肉眼可见的凝集现象。 直接凝集反应：在适当电解质参与下，细菌、螺旋体和红细胞等颗粒性抗原直接与相应抗体结合后出现肉眼可见的凝 集现象，称为~ 。 间接凝集反应：可溶性抗原（或抗体）先吸附于适当大小的颗粒性载体（如正常人 O 型红细胞、细菌、胶乳颗粒等） 的表面，然后与相应抗体（抗原）作用，在适宜的电解质存在条件下出现特异性凝集现象，称为~ 。其敏感度高于直 接凝集反应和沉淀反应。 正向间接凝集反应：用可溶性抗原致敏载体以检测标本中的待检抗体。 反向间接凝集反应：用特异性抗体致敏载体以检测标本中的待检抗原。 间接凝集抑制反应：用抗原致敏的载体颗粒及相应的抗体作为诊断试剂，检测标本中是否存在与致敏抗原相同的抗原。 2.抗人球蛋白试验的类型及其原理。 原理：Coombs 试验又称抗人球蛋白试验，用于检测红细胞不完全抗体，其原理是：不完全抗体多半是 7S 的IgG 类抗 体，能与相应的抗原牢固结合，但因其分子量较小，体积小，不能起到桥联作用，在一般条件下不出现可见反应，利 用抗球蛋白抗体作为第二抗体，连接与红细胞表面抗原结合的特异抗体，可使红细胞凝集。 Coombs 试验有二种类型：(1)直接 Coombs 试验：用于检测红细胞结合的不完全抗体。将抗人球蛋白试剂直接加到表 面结合抗体的受检红细胞中，即可见细胞凝集。常用于检测新生儿溶血症，自身免疫性溶血症，特发性自身免疫性贫 血的患者红细胞上不完全抗体。 (2)间接 Coombs 试验：用于检测血清中游离的不完全抗体。将受检血清和具有相应抗原性的红细胞相结合，再加入 抗人球蛋白抗体即可出现可见的红细胞凝集。多用于检测母体 RhD 抗体，红细胞不相容输血后产生的血型抗体。 3.沉淀反应：是指可溶性抗原与相应抗体在适当条件下发生特异性结合而出现可见的沉淀现象。 4 ．双向免疫扩散试验： 原理：是将抗原核抗体加在同一琼脂板的对应孔中，各自向对方扩散，在浓度比例恰当处形成沉淀线。观察沉淀线的 位置、形状及对比关系，可对抗原或抗体进行定性分析。 应用：1.判断抗原或抗体的存在以及估计相对含量。沉淀线靠近抗原孔，说明抗体浓度较大；靠近抗体孔则说明抗原 浓度大。2.分析抗原或抗体相对分子量。形成的沉淀线弯向分子量大的一方。3.分析抗原的性质。（待测物为两种抗原） 两条沉淀线互相吻合相连，两抗原中存在相同表位；两条沉淀线交叉，说明两抗原完全不同；两条沉淀线相切，提示 两抗原之间有部分相同。4.抗体效价的滴定。5 鉴定抗体或抗原纯度。 5.免疫固定电泳 （IFE ）： 原理：实质是区带电泳和沉淀反应相结合。先将血清蛋白质置于琼脂凝胶中进行区带电泳分离，再将固定剂和各型免 疫球蛋白及轻链抗血清加于凝胶表面的泳道上，经过孵育，固定剂和抗血清在凝胶内渗透、扩散，抗原抗体直接发生 沉淀反应，洗脱游离的抗体，形成的抗原抗体复合物则保留在凝胶中。经氨基黑，参考泳道和抗原抗体沉淀区被着色， 根据电泳移动距离分离单克隆组分，可对各类 Ig 及其轻链进行分型。 应用：最常用于 M 蛋白的鉴定与分型。。 荧光免疫技术：是将抗原抗体反应与荧光技术相结合而建立的一种免疫荧光技术，具有高度特异性、敏感性和直观性。 第七章 1.荧光：荧光物质吸收激发光的能量后，使原来处于基态的电子跃迁到激发态，当其回复至基态时，激发态的电子以 发射光的形式释放出能量，这种发射光称为~ 。 ①发射光谱：是指固定激发光波长，在不同波长下所记录到的样品发射荧光的谱图 ②激发光谱：是指固定检测发射光（荧光）波长，用不同波长的激发光照射样品得到的荧光的谱图。 ③荧光效率：是指荧光分子将吸收的光能转变成荧