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实验九 血糖的测定与应用;1 实验目的;2 实验原理;⑵ 葡萄糖试剂盒测定法:;血糖浓度是相对恒定的,这是由于体内存在着各
种调节血糖浓度的生理机制。
饱食和大量食糖后大量葡萄糖进入血液,使之血
糖浓度增高,糖原的合成速度随之增大,但血糖浓度不久即恢复到正常。
长时间运动中血糖也有下降现象,下降程度因人
而异。如马拉松赛跑时,中途退场者多因血糖下 降而被迫终止比赛,能坚持跑到底,成绩优异者,血糖不下降或下降很少,所以血糖是评定运动耐 力素质,监控耐力训练的生化指标之一。;正常值: 3.89-6.11mmol/L (70-110 mg/dl);3 实验器材与试剂;⑵ 试剂
① 0.03 mol/L H2SO4
② 1%钨酸钠
③ 碱性铁溶液:铁氰化钾0.8g,无水碳酸钠2.0g,加 蒸馏水溶解并至200ml,贮于棕色瓶中。
④ 酸性硫酸高铁铵溶液:称取硫酸高铁铵2.0g,溶于50ml蒸馏水中,加入85%磷酸20ml,然后用纯净蒸馏水定容到100ml。;⑤ 葡萄糖标准液
贮存液(10mg/ml):称取纯无水葡萄糖1.00g用0.25%苯甲酸溶液溶解,倾入100ml容量瓶,最后用0.25%苯甲酸溶液稀释至刻度,摇匀,放冰箱保存。
标准糖应用液I(0.02mg/ml):准确吸取贮存液0.2ml,置于100ml容量瓶中,加入0.25%苯甲酸液至刻度(用于标准管测定)。
标准糖应用液II(0.05mg/ml):准确吸取上述贮存液 0.5ml,置于100ml容量瓶中,用0.25%苯甲酸液稀释至刻度(作标准曲线用)。
0.25%苯甲酸溶液:称取苯甲酸2.5g,加入煮沸的蒸馏水 1000ml中,使成饱和溶液,冷却后,取上清液备用。;4 实验方法与步骤;;;⑵ 试剂盒测定法:
如:采用浙江东瓯生物工程有限公司生产的葡萄糖测定试剂盒,按其操作步骤略加改进。
① 基本参数:
方法:终点法;波长:500nm;比色光径:0.5cm或 1cm;反应温度:37℃;反应时间:10min;标本/试剂:1:150。;;③ 计算:;⑶ 标准曲线制法
标准曲线就是一系列不同浓度(含量)标准溶液的光密度值对其相应的浓度(含量)作图,所得的坐标曲线。
标准曲线使测定工作简便,当需要测定大批样品或多次测定时,制作标准曲线,可免去标准管和对每份样品的计算,只需作测得的各样品光密度数值,查标准曲线便可迅速得出??样品的浓度(或含量)。;;用光密度作纵坐标,葡萄糖浓度(mg%)作横坐标,将不同浓度的各标准管读数分别点在坐标纸上
(内侧),通过各点作一平滑曲线,在曲线上可查得测定管的血糖含量,如图3-4。;5 注意事项;6 思考题
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