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高尿酸体外诱导大鼠海马神经炎症的分子机制的初步研究
摘要
[目的]
探讨高浓度的尿酸是否能诱导大鼠海马神经细胞产生炎症因子,并探究其具体机制如何。
[方法]
选取胎鼠的大脑海马区进行原代细胞培养以获得大鼠海马细胞。而后在适应性的培养环境下,通过控制变量
法,将大鼠海马细胞分别在空白对照组和含600mg/ml尿酸的实验组这两份培养液中培养48小时。使用qRT-PCR分别检测空白组和实验组炎症因子和炎症信号通路中Nfkbia等的mRNA水平,对比其数值。
[结果]
相比于空白对照组,实验组的炎症因子Nfkbia、Il1b、Ikbkb、Ikbke、Il6、Tnfa、Ccl2、Hif2a、Tlr4水平均有明显上升,Socs3在24小时表达水平略低于空白组,48h时高于空白组。证明高尿酸环境的大鼠海马细胞炎症因子和NF-κB信号通路中Nfkbia等分子表达升高。
[结论]
高尿酸可以直接诱导被分离的大鼠海马神经细胞产生炎症因子,初步判断该变化与高尿酸诱导大鼠海马炎症的病理过程有关。
关键词:高尿酸血症;海马神经细胞;炎症因子;荧光定量PCR
前言
诊断高尿酸血症的物理检测标准:在摄入正常量嘌呤的饮食状态下,非同日2次空腹时血清尿酸( serum uric
acid,SUA)值,女性血液中尿酸盐浓度6.0 mg/dL(360 mol/L),男性7.0 mg/dL(415 mol/L),儿童和青少年5.
5 mg/dL(330 mol/L)时所定义的病症[1]。由于在进化过程中,灵长类动物编码尿酸酶的基因发生了假基因化,导致人类自身无法转化尿酸,而尿酸是嘌呤代谢的终末产物,所以人体内尿酸易堆积,代谢困难。虽然尿酸是人体内很重要的水溶性内源性抗氧化剂,但是异常高浓度的血尿酸是高血压、代谢综合征等疾病发病的危险因素,其所带来的危害,相较于其参与有害自由基清除,参与保护神经的作用是完全弊多利少的。高尿酸血症最明显的症状是痛风,除此之外还与肾脏代谢、内分泌、等的代谢性疾病发生有关,而Masanari等的流行病学研究发现,血清尿酸水平还与心房纤维化等心血管疾病相关,严重危害着人体健康。
随着物质生活水平的提高,高尿酸血症在世界范围的发病率逐年上升。现在在我国,痛风是仅次于糖尿病的第二大代谢类疾病,威胁着人们的健康[2]。截至2018年,我国高尿酸血症患者人数已1.7亿,其中痛风患者超过8000 万人,且正以9.7%的年增长率迅速增加,如今早已超过这个数字。调查显示,患者人数多分布在沿海地区、珠三角、环渤海、长三角等经济发达地区。魏晓珠等人在深圳沿海地区2753人的研究中发现,高尿酸血症患病率为15.
44%,其中男性为18. 27%,女性为11. 55%,处于国内较高水平。吕雪霞等人从健康体检人群中随机抽样分析得到高尿酸血症患病率为 11. 67%,其中男性为15. 31%,女性为 4. 81%。也有流行病学数据表明,美国成年人的高尿酸血症患病率高达21. 4%,而且随着时间的推移,这一数字还在继续增大;意大利学者的数据表明,以尿酸值 6. 0 mg /dL ( 360 mol /L) 为界,2009 年间高尿酸血症患病率有从 8. 5% 上升至 11. 9%;台湾土著人口有着全世界最高的高尿酸血症患病率,高达41. 4%。因此,性别和年龄的增长也是高尿酸血症的重要影响因素,且男性比女性更容易患高尿酸血症[3]。而导致高尿酸血症患病率增加的因素有饮食模式和代谢物质的改变、预期寿命的延长、肥胖率的增加以及利尿剂等药物的长期使用等等,其中高嘌呤饮食和饮酒是高尿酸血症的主要诱因,若长此以往摄入过多嘌呤便更容易诱发高尿酸血症。
与此同时,大量研究结果证实,除了抗氧化应激特性外,尿酸还在血管内皮功能障碍、脑血管病发病方面起重要作用,以及介导炎症反应[4]。高于正常范围的血尿酸水平将对脑结构造成损伤。郑声浩等人的实验表明,在急性期脑梗死时,血清尿酸水平的增高会引起致脑梗死危险因素的聚集以及细胞炎症因子水平的升高,进而共同参与脑梗死的病理生理过程,对神经功能造成严重损伤[5]。由此可知,高尿酸与急性脑梗死具有密切关系,可作为引发急性脑梗死的独立性诱发因素[6],并且在人体内较高的尿酸水平会引起细胞炎症因子表达水平上调。
有调查研究显示,男性高尿酸血症患者在区域及网络水平上存在脑功能异常[7],因此高于正常浓度的尿酸水平会引起情绪及认知功能改变,进而影响大脑的学习、记忆功能。虽然血清尿酸在正常值范围内,适当提高血清尿酸水平可能会对轻度认知功能障碍具有保护作用[8]。邵晓妮等人的大鼠实验表明,高尿酸不仅可以干扰机体的正常代谢,而且高尿酸血症大鼠相较于空白组大鼠有更长的逃逸潜伏期,证明高尿酸可以引起认知功能障碍[9],其诱发认知功能
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