番茄及其制品中六氢番茄红素和八氢番茄红素的测定.pdfVIP

番茄及其制品中六氢番茄红素和八氢番茄红素的测定 高效液相色 谱法 警示——使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验。本标准并未指出所有可能的安全问题。 使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关规定的条件。 1 范围 本文件规定了番茄及其制品中六氢番茄红素和八氢番茄红素的高效液相色谱测定方法。 本文件适用于番茄及其制品中六氢番茄红素和八氢番茄红素的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本 （包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 原理 试样中的六氢番茄红素和八氢番茄红素经提取剂正己烷：甲醇：丙酮 （2：1：1，v/v/v）提取，用 少量乙酸乙酯溶解，甲醇：甲基叔丁基醚 （1：1，v/v, 色谱纯）定容，采用反相色谱法分离，由紫外 检测器检测，参照标准品的保留时间和峰面积进行定性和定量。 5 试剂和材料 除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682规定的一级水。 乙腈(CHCN)：色谱纯。3 甲醇(CHOH)：色谱纯。3 甲基叔丁基醚[CHOC(CH) ，MTBE]：色谱纯。 3 3 3 正己烷(CH )。 6 14 丙酮 （CHCOCH ）。3 3 乙酸乙酯 （CHO ，EA）。 4 8 2 提取液：正己烷：甲醇：丙酮 （2：1：1，v/v/v）按体积比混匀备用。 六氢/八氢番茄红素储备液稀释液：甲醇：甲基叔丁基醚 （1：1，v/v）按比混匀备用。 六氢番茄红素 （C H ，CAS号：540-05-6）：纯度大于或等于97%。 40 60 八氢番茄红素 （C H ，CAS号：540-05-5）：纯度大于或等于97%。 40 62 六氢番茄红素/八氢番茄红素标准储备液 （1mg/mL）：1mg六氢番茄红素/八氢番茄红素标准品， 分别加1mL 乙酸乙酯溶解，转移至棕色小瓶封口。于-20℃下避光贮存，使用期限不超过 1个月，标准 储备液用前需参考初次试验所得标准曲线及附录A提供的六氢和八氢番茄红素标准品的色谱和光谱图， 若浓度有所降低或峰型和光谱图与参考有异，则判定标准储备液失效，改用标准曲线来定量。 六氢番茄红素/八氢番茄红素标准系列工作溶液：准确移取适量标准储备液 （5.11）于1mL容量 瓶中，用稀释液 （5.8）稀释定容配成系列标准溶液，浓度分别为2.5 µg/mL、5 µg/mL、7.5 µg/mL、 10 µg/mL、12.5 µg/mL、20 µg/mL、50 µg/mL 的混合标准工作液。临用现配。 1 6 仪器设备 高效液相色谱仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器。 天平：感量为0.01 g和0.0001 g。 打浆机 （果汁机、料理机皆可）。 筛网 （14 目）。 磁力搅拌器。 真空泵。 旋转蒸发仪。 超声波清洗器。 微孔滤膜：0.22 µm，聚四氟乙烯 （PTFE）材质。 7 样品制备 含水样品 新鲜番茄：随机取样2个～4个，去蒂、清洗、切块 （约1cm～2 cm ），用打浆机 （6.3）破碎30 s3 3 成匀浆，匀浆过14目筛网 （6.4）去除绝大多数皮和籽。取番茄浆5g，精确到1mg，取样抽滤去除绝大 多数水分，将滤渣转移至锥形瓶中，待下一步提取。 番茄饮料：依据产品中番茄的添加量，取相当于含鲜番茄15 g～20 g的样品，精确到1mg，取样抽 滤去除绝大多数水分，将滤渣转移至锥形瓶中，待下一步提取。 番茄酱：称取0.5 g番茄酱至锥形瓶中，待下一步提取。 粉剂 番茄粉：称取0.5 g番茄粉至锥形瓶中，待下一步提取。 油剂 番茄籽油：称取0.5 g番